Технология получения пробиотиков. Способ получения пробиотиков базируется на использовании технологической схемы, которая включает в качестве основных стадий:
Процесс культивирования штаммов,
Стабилизацию бактериальной культуры,
Изготовление лекарственной формы препарата.
В пробиотическом производстве для накопления биомассы бактерий чаще всего используется глубинное культивирование, являющееся необходимой технологической стадией. Эффективность этого процесса зависит от качества питательной среды, маточной культуры и параметров режима культивирования, которые определяются техническим уровнем оборудования.
Лактобактерии характеризуются высокой требовательностью к качеству питательных субстратов, являющихся источником энергии и веществ, необходимых им для построения клетки. Они нуждаются в полном наборе готовых аминокислот, водорастворимых витаминов группы В, азотистых основаниях, минеральных элементах, углеводах,
неорганических соединениях и т.д. Этим можно объяснить относительно многокомпонентный состав питательных сред, которые традиционно используют для культивирования молочнокислых бактерий.
Поскольку правильный подбор питательной среды в значительной степени определяет качество и успех эксперимента, исследования в данном направлении продолжаются. Разрабатываются новые питательные среды, модифицируются уже известные и широко
применяемые: молочно-дрожжевая среда (МДС), модифицированная гидролизатно-молочная среда (ГМС) и т.д.
Для культивирования лактобактерий наиболее широко используемой является классическая МРС-среда, предложенная Де Меном и другими соавторами в 1960 году, а также ее различные модификации: среда MRS, среда РС для выделения лактобацилл и
лактококков, среда с Твин-80.
Следующей основной стадией в производстве пробиотиков после культивирования является стадия стабилизации бактериальной культуры, которая должна обеспечить сохранность жизнеспособность клеток. В препарате на протяжении всего срока годности.
Для стабилизации бактериальной массы в технологии пробиотиков традиционно используют лиофилизацию – высушивание из замороженного состояния. Сохранение жизнеспособности клеток обеспечивается за счет естественной, выработанной в процессе эволюции способности микроорганизмов впадать в анабиоз в засушливый период. Это наиболее надежный способ сохранения биоматериалов. Лиофилизированные культуры могут поддерживаться в живом состояние в течение ряда лет при положительных температурах, сохраняя при этом все биологические свойства, с минимальными потерями по количеству живых клеток. Поэтому данный вид стабилизации бактериальных культур получил широкое распространение.
Высушенные и замороженные требуют обязательного применения протекторов, защищающих мембранные структуры клеток от потери воды. Наиболее значительные успехи в повышении выживаемости микробов в процессе лиофильного высушивания были, достигнуты благодаря подбору эффективных защитных сред.
Общепринятый способ получения лекарственных форм пробиотиков базируется на использовании сухой биомассы, получаемой, как правило, лиофилизацией производственных культур с добавлением защитных средств. Технологические исследования с живыми культурами бифидобактерий показали возможность изготовления суппозиториев на основе лиофильно-высушенной биомассы с добавлением ряда стабилизаторов.
В качестве альтернативного технологического варианта представляет интерес способ стабилизации жидких бактериальных взвесей с помощью компонентов носителей, обеспечивающих анабиоз живых клеток. В качестве стабилизирующих композиций могут выступать гидрофильные компоненты мазевых и суппозиторных основ. Сущность предлагаемого решения в том, что в состав мягких лекарственных форм вводят жидкую культуру штаммов, применяемых в производстве пробиотиков, а стабилизация жидкой бактериальной культуры осуществляется путем ее перевода в гелеобразное состояние с помощью ПАВ. В качестве ПАВ используется Na-КМЦ и аэросил, имеющие щелочной характер, и обеспечивают получение устойчивого геля.
С помощью усовершенствования технологических приемов, применяемых при стабилизации культур лактобактерий, для получения сухой биомассы с улучшенными показателями по гигроскопичности и сыпучести материала возможно производство порошковых и других лекарственных форм. В качестве ксеропротекторов и наполнителей используют различные варианты, отличающихся по структурообразущему компоненту (желатин, натрий карбоксиметилцеллюлоза, поливинилпиролидон, крахмал картофельный, аэросил, лактозу).
Изучение морфологических, тинкториальных и культуральных свойств пробиотических штаммов
Достарыңызбен бөлісу: |