Атты III халықаралық ғылыми-тәжірибелік конференция жинағЫ
жүктеу/скачать 8,11 Mb. Pdf көрінісі
|
III TOM
| Материалы и методы.
Объектам исследования являлось молоко. Метод определения основан на извлечении антибиотика органическим растворителем, очистке экстракта методом и хроматографическом разделении с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-селективным детектором. Была проведена идентификация, и количественное определение антибиотика проводилось с помощью градуировочного графика идентифицированного антибиотика. Разделение компонентов осуществляли с использованием УВЭЖХ-системы Thermo Ulti- Mate-3000 с тройным квадрупольным масс-спектрометрическим детектором Thermo TSQ Quantum Access Max с источником нагреваемой электрораспылительной ионизации в режиме регистрации ионов с помощью колонки Thermo Scientific™ Hypersil™ BDS C18 (100×4 мм). В качестве подвижной фазы использовали ацетонитрил квалификации «для ВЭЖХ-МС» (Sigma, Франция). Условия хроматографирования: температура термостата 35º С; подвижная фаза (А)- вода и 5% ацетонитрил, (В)- ацетонитрил; скорость потока элюента 0,5 мл/мин; объем вводимой пробы 20 мкл. Режим работы масс-спектрометра TSQ Quantum Access полярность: отрицательная напряжение на капилляре: 3000 В; температура ионного источника: 300 °С; sheath gas: 45; auxiliary gas: 10; фрагментация в источнике: -7 В; разрешение Q1 и Q3: 0,7 а.е.м.; скорость сканирования: 0,1 сек./скан Результаты и их обсуждение. "SCIENCE AND EDUCATION IN THE MODERN WORLD: CHALLENGES OF THE XXI CENTURY" NUR-SULTAN, KAZAKHSTAN, JULY 2019 346 Для проверки линейности калибровки и чувствительности метода были приготовлены стандартные растворы хлорамфеникола концентрациями 0,03125; 0,0625; 0,125; 0,25; 0,50; 1 нг/мл, которые анализировали при указанных выше условиях хроматографирования. По полученным данным при помощи программного обеспечения Xcalibur и Chromeleon Xpress был построен калибровочный график зависимости относительной площади пика (площадь пика анализируемого вещества, деленная на площадь пика внутреннего стандарта) от относительной концентрации (концентрация анализируемого вещества, деленная на концентрацию внутреннего стандарта) – рисунок 1. Рисунок 1 Калибровочный график В исследованной пробе не было обнаружено содержание хлорамфеникола, ниже приведена хроматограмма. |