Этапы приготовления питательной среды

1.  Взвешивание:  отбирают  навески  компонентов  питательной 

среды на аналитических весах; 

2.  Растворение:  компоненты  питательной  среды  растворяют  в 

предварительно нагретой до 70 °С дистиллированной воде. Растворы мак-

ро- и микросолей готовят отдельно. Растворы фосфатов входящих в состав 

макросолей также готовят отдельно, т. к. в процессе стерилизации в авто-

клаве они выпадают в осадок и в дальнейшем вновь требуют растворения.  

3.  Кипячение:  растворы  питательных  сред  кипятят  на  водяной 

бане в течении 2 мин. 

4.  Установление pH: ориентировочно производят с помощью ин-

дикаторной бумаги, для точного определения пользуются потенциомет-

ром.  При  стерилизации pH снижается  на 0,2, поэтому  сначала  готовят 

более щелочной раствор. 

5.  Фильтрация  жидких  и  расплавленных  плотных  сред  произво-

дят  через  влажный  бумажный  или  матерчатый  фильтры.  Фильтрация 

агаровых  сред  затруднена –  они  быстро  застывают.  Обычно  их  филь-

труют через ватно-марлевый фильтр. 

8 

6.  Розлив сред: питательные среды разливают не более чем на 3/4 

емкости,  так  как  при  стерилизации  могут  намокнуть  пробки  и  среды 

утратят стерильность. 

7.  Стерилизация:  для  стерилизации  питательный  сред  использу-

ют термический способ: стерилизация насыщенным паром под давлени-

ем  (автоклавирование),  дробная  стерилизация  (тиндализация),  кипяче-

ние. Режим стерилизации зависит от состава среды и указан в её рецеп-

те. При автоклавировании 3–5 % жидкости теряется в результате испа-

рения,  поэтому  рекомендуется  в  приготавливаемые  среды  добавлять 

сверх  объема  примерно 5 % дистиллированной  воды.  Тогда  после  сте-

рилизации среда будет иметь требуемую концентрацию.  

8.  Контроль: 

 

для  контроля  стерильности  среды  ставят  на 2 суток  в  термо-

стат, после чего их просматривают. 

 

химический контроль окончательно устанавливает pH, содержа-

ние общего и амминого азота, пептона, хлоридов. 

 

для биологического контроля несколько образцов среды засева-

ют специально подобранными культурами, и по их росту судят о пита-

тельных свойствах среды. 

жүктеу/скачать 469,16 Kb.

Достарыңызбен бөлісу: