Третий день исследования
Чашки вынимают из термостата, просматривают их с помощью лупы или
стереоскопического микроскопа. При наличии подозрительных колоний часть
их под контролем стереоскопического микроскопа выделяют на агар с 25%
сывороткой и на столбик со средой Пизу
для определения фермента
цистиназы. Из другой части колоний ставят пробу на токсигенность.
При микроскопическом исследовании колоний, снятых со среды Клауберга,
коринебактерии дифтерии теряют свою специфичность: отсутствует
зернистость, изменяется величина, расположение сохраняется. При посеве их
на среды с сывороткой морфологическая
специфичность возбудителей
дифтерии восстанавливается.
Проба на наличие фермента цистиназы и определение токсигенности
являются обязательными при идентификации возбудителей дифтерии. Если
результат этих опытов,
проведенных с частью колоний со среды Клауберга,
недостаточно
четкий или отрицательный, то опыт повторяют,
используя
выделенную чистую культуру.
Проба на цистиназу. Проводят посев исследуемой
культуры уколом в
центр столбика среды Пизу. При положительной реакции через 18-24 ч по ходу
укола наблюдается почернение, а вокруг черного стержня образуется темное
облачко; почернение происходит в результате того,
что фермент цистиназа
расщепляет цистин, входящий в состав среды Пизу, и освободившаяся сера
вступает в реакцию с ацетатом свинца - образуется сульфит свинца черного
цвета. Дифтероиды и ложнодифтерийные палочки не содержат фермент
цистиназу, поэтому при росте их на среде Пизу цвет среды не изменяется.
Достарыңызбен бөлісу: 
