С курсом факультета повышения квалификации и переподготовки кадров



Pdf көрінісі
бет170/375
Дата31.12.2021
өлшемі2,61 Mb.
#21760
1   ...   166   167   168   169   170   171   172   173   ...   375
Байланысты:
Farmatsevticheskaia biotekhnologiia Moiseev-DV 2020

 
 
 
 
 
 
 
Рисунок 12.3 – Первое клонирование гибридных клеток на полной 
культуральной среде
 
 
Идентификация гибридных клеточных линий, секретирующих 
специфические антитела 
Теперь 
необходимо 
идентифицировать 
гибридные 
клетки, 
вырабатывающие АТ к иммунизирующему АГ. Для этого обычно проводят 
скрининг культуральной среды в лунках, содержащих секретируемые АТ. 
Среду  из  тех  лунок,  в  которых  есть  растущие  клетки,  отбирают  и 
переносят  в  лунки  другой  микротитровальной  плашки,  предварительно 
покрытые  слоем  молекул  АГ-мишени.  Если  в  культуральной  среде 
находится АТ (первое антитело), распознающее один из эпитопов данного 
АГ,  то  оно  свяжется  с  АГ  и  останется  в  лунках  после  их  промывания. 
Затем  в  лунки  добавляют  второе  АТ,  специфичное  к  мышиным  АТ.  Оно 
будет  присоединяться  к  любому  первому  АТ,  связанному  с  АГ.  К 
используемому  в  иммунном  анализе  второму  АТ  предварительно 
присоединяют  фермент,  который  превращает  неокрашенный  субстрат  в 
окрашенное  соединение.  Изменение  цвета  содержимого  одной  из  лунок 
говорит  о  том,  что  исходная  культуральная  среда  содержала  АТ, 



Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   166   167   168   169   170   171   172   173   ...   375




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет