"фараби əлемі" атты халықаралық ғылыми конференция материалдары


СРАВНЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ МЕТОДОВ ИФА И ОТ-ПЦР В ДИАГНОСТИКЕ



Pdf көрінісі
бет272/372
Дата02.03.2022
өлшемі2,79 Mb.
#26858
1   ...   268   269   270   271   272   273   274   275   ...   372
Байланысты:
thesis114326

СРАВНЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ МЕТОДОВ ИФА И ОТ-ПЦР В ДИАГНОСТИКЕ 
ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ КАРТОФЕЛЯ В РЕСПУБЛИКЕ КАЗАХСТАН 
 
Александрова А.М., Наргилова Р.М. 
Институт молекулярной биологии и биохимии им. М.А. Айтхожина 
alena_pisarenko@inbox.ru
   
 
Картофель  в  Казахстане  является  основной  продовольственной  культурой  и  занимает  второе 
место по популярности после пшеницы. Размножение картофеля вегетативным способом приводит к 
накоплению  в  клубнях  большого  числа  патогенов  и  снижению  общей  урожайности.  Основной 
проблемой  картофелеводства  являются  вирусные  инфекции,  фенотипическое  проявление  которых 
часто  отсутствует.  Наиболее  распространенными  и  вредоносными  вирусами  картофеля  являются 
вирус скручивания листьев картофеля (Potato leaf roll virus, PLRV), M-, S-, X- и Y-вирусы картофеля 
(Potato  virus  M,  PVM;  Potato  virus  S,  PVS;  Potato  virus  X,  PVX;  Potato  virus  Y,  PVY).  Диагностика 
картофеля  на  присутствие  вирусных  инфекций  –  необходимый  этап  оценки  и  сертификации 
посадочного  материала,  технологий  оздоровления  картофеля,  общего  санитарного  состояния 
посевных площадей. 
В  настоящее  время  разработано  множество  методов  анализа  растений  на  наличие  вирусных 
инфекций.  Наиболее  массово  из  них  применяются  иммуноферментный  анализ  (ИФА)  и  обратная 
транскрипция,  сопряженная  с  полимеразной  цепной  реакцией  (ОТ-ПЦР).  Эти  методы  отличаются 
высокой чувствительностью и достоверностью полученных результатов.  
Мы сравнили эффективность обнаружения вирусов PLRV, PVM, PVS, PVX и PVY в образцах 
картофеля  (167  образцов),  выращенных  на  территориях  Алматинской  и  Костанайской  областей, 


186 
 
методами ИФА и мультиплекс ОТ-ПЦР (мпОТ-ПЦР). Вирус PLRV не был обнаружен ни в одной из 
анализируемых  проб.  Вирусы  PVS,  PVX  и  PVY  эффективнее  обнаруживались  методом  мпОТ-ПЦР 
(3.59,  7.19  и  4.19%  против  0.6,  4.19  и  2.99%  соответственно).  Для  PVM  наиболее  результативным 
оказался ИФА – 41.32% против 35.33% согласно мпОТ-ПЦР. PVM не обнаруживался методом мпОТ-
ПЦР, если его показания на ИФА не превышали 0.4 ед. от отрицательного контроля. Возможно, это 
связано  с  особенностями  нуклеотидной  последовательности  геномной  РНК  изолятов  PVM, 
распространенных на территории Казахстана.  
Таким  образом,  для  подтверждения  вирусных  заболеваний  в  полевых  условиях  метод  ИФА 
предпочтительнее  благодаря  простоте  и  отсутствию  необходимости  использования  сложного 
оборудования.  Метод  ИФА  не  позволяет  идентифицировать  различные  изоляты  вирусов,  в  этом 
случае  использование  ОТ-ПЦР  предпочтительнее.  Однако  при  работе  с  культурой  в  условиях 
лаборатории  считаем  необходимым  использовать  оба  метода  для  подтверждения  результатов 
диагностики. 
Научный руководитель: д.б.н., профессор Искаков Б.К. 
 


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   268   269   270   271   272   273   274   275   ...   372




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет