65
Для четырех образцов древних лошадей проведен
молекулярно-генетический анализ. Из
костного порошка была
выделена ДНК по разработанному протоколу, позднее изменен-
ному. Выделенная ДНК обрабатывалась ферментом USER
(Uracil-
Specific Excision Reagent), генерирующим одиночный
нуклеотидный разрыв в месте расположения остатка урацила, в
который цитозин деаминируется посмертно. Из ДНК, обрабо-
танной ферментом USER, приготовлены геномные библиотеки в
соответствие с протоколом M. Kircher & M. Meyer.
Данные
библиотеки были амплифицированы и индексированы при
помощи ПЦР (полимеразная цепная реакция), а затем
секвенированы с небольшой глубиной покрытия. Этот этап
необходим для понимания процентного содержания эндогенной
ДНК в образце, клональности и последующего отбора образцов
с содержанием эндогенной ДНК выше 8% для секвенирования с
большим количеством прочтений и получения полного генома с
покрытием 1–8 раз. Два отобранных образца были отправлены
на радиоуглеродный анализ. По ним имеются результаты AMS-
датирования (UCIAMS-199240 4700+15 л.н.; UCIAMS-199241
4665+
20 л.н.). Калиброванные показатели определяют середину
– 2-
ю половину IV тыс. до н.э. К настоящему моменту получены
полные
геномы данных образцов, что позволяет провести
дальнейшую аналитическую работу.