Литература для студентов Учебная литература для студентов медицинских вузов и медицинских
жүктеу/скачать 31,79 Mb. Pdf көрінісі
|
Гистология Афанасьев 2004
- Бұл бет үшін навигация:
- Метод радиоавтографии.
- Методы иммунофлюоресцентного анализа. Применение антител.
| Радиоактивные изотопы
при распаде ядра испускают заряженные части цы (электроны) или излучение (например, гамма-лучи), которые можно за регистрировать в специальных приборах. Радиоактивные изотопы использу ют в методе радиоавтографии. Например, с помощью радиоизотопов 3Н-ти- мидина исследуют ДНК ядра, с помощью 3Н-уридина — РНК. Метод радиоавтографии. Этот метод дает возможность наиболее полно изучить обмен веществ в разных структурах. В основе метода лежит исполь зование радиоактивных элементов (например, фосфора — 32Р, углерода — 4С, серы — 35S, водорода — 3Н) или меченных ими соединений. Радиоактив ные вещества в гистологических срезах обнаруживают с помощью фото эмульсии, которую наносят на препарат и затем проявляют. В участках пре парата, где фотоэмульсия соприкасается с радиоактивным веществом, про исходит фотореакция, в результате которой образуются засвеченные участки (треки). Этим методом можно определять, например, скорость включения меченых аминокислот в белки, образование нуклеиновых кислот, обмен йо да в клетках щитовидной железы и др. Методы иммунофлюоресцентного анализа. Применение антител. Антите ла — защитные белки, вырабатываемые плазмоцитами (производными В- лимфоцитов) в ответ на действие чужеродных веществ (антигенов). Количе ство различных форм антител достигает миллиона. Каждое антитело имеет участки для "узнавания" молекул, вызвавших синтез этого антитела. В связи с высокой специфичностью антител в отношении антигенов они могут быть использованы для выявления любых белков клетки. Для выявления локали зации белков антитела окрашивают флюоресцирующими красителями, а за тем клетки изучают с помощью флюоресцентной микроскопии. Антитела можно использовать также для изучения антигенов на ультраструктурном уровне с помощью электронного микроскопа. Для этого антитела метят электронно-плотными частицами (микросферы коллоидного золота). Для усиления специфичности реакции применяют моноклональные антитела, образуемые линией клеток, — клонами, полученной методом гибридом из одной клетки. Метод гибридом позволяет получать моноклональные анти тела с одинаковой специфичностью и в неограниченных количествах. Методы иммунофлюоресцентного анализа широко и эффективно ис пользуются в современной гистологии. Эти методы применяются для изуче ния процессов дифференцировки клеток, выявления в них специфических химических соединений и структур. Они основаны на реакциях ан ти ген - антитело. Каждая клетка организма имеет специфический антигенный со став, который главным образом определяется белками. Продукты реакции можно окрашивать и выявлять в люминесцентном микроскопе, например выявление актина и тубулина в клетке с помощью метода иммунофлюорес центного анализа. Современные методы исследований позволяют проводить анализ хими ческого состава различных структурных компонентов клеток, как фиксиро 22 ванных, так и живых. Изучение отдельных внутриклеточных структур стало возможным после разработки технологий фракционирования клеточного содержимого. жүктеу/скачать 31,79 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|