Микробиология

51 
қашықтықта орналастырылады. Ультракҥлгін сәулесі
 Escherichia coli
-дің 
ДНҚ-ын зақымдай
. 
Мҧндай сәулелендіруді қызыл немесе қараңғыда 
жерде ӛткізген дҧрыс. Алдын ала ультракҥлгін сәулесінің бактероцидтік 
дозасы анықталынады. Бактероцидтік дозаның оңтайлы мӛлшерін тірі 
қалған бактериялардың санына (0,1-1%-ға тең) сәйкес есептеп 
шығарады. 
Escherichia coli
-дің 
lac
-мутанттарын бӛліп алу ҥшін зерттелетін 
ӛсіндіні алдын ала 14-18 сағат бойы сҧйық қоректік ортада ӛсіреді. 1 мл 
сҧйық қоректік ортадағы бактерия жасушаларының мӛлшері шамамен 
2∙10
8
болуы керек. Пайда болған бактерия жасушаларын центрифугалау 
арқылы тҧндырып, 40 мл 0,1М MgSO
4
ерітіндісінде қайта араластырады 
да, жасушалардың бӛлінуі тоқтағанша мҧзда салқындатады. 50 мл 
кӛлемдегі сузпензияны стерильді Петри шынысына қҧйып, 15-150 
секунд бойы сәулелендіреді. Сәулелендірілген бактерия жасушаларын 
центрифугағаннан кейін пайда болған тҧнбаны бастапқы мӛлшердегі 
сҧйық қоректік ортамен қайта араластырып, шыны тҥтікке қҧяды. 
Шыны тҥтіктегі ӛсіндіні 37ºС температураға реттелген термостатта 14-
18 сағат инкубациялайды. Сонан соң 10
-2
-10
-5
дайындалған 
сҧйылтымдарының 0,1 мл-інен Петри шыныларындағы тығыз селективті 
қоректік ортаға (Эндо қоректік ортасы) себінді жасалады. 
Антибиотиктерге тӛзімді мутанттарды бӛліп алу жҧмыстарында 
Escherichia coli
-дің В және К штамдары қолданылады. Оларды 
сәулелендіргеннен кейін белгілі бір концентрациядағы антибиотик 
(ампициллин - 0,01 мг/мл, левомицетин - 0,005 мг/мл, пенициллин - 0,1 
мг/мл) қосылған агарға себінді жасалады. 
Эндо қоректік ортасында 
Escherichia coli
-дің 
lac
-мутанттары тҥссіз 
колонияларды тҥзеді. Аталмыш концентрациядағы антибиотиктер 
қосылған қоректік ортада 
Escherichia coli
жасушалары ӛсетін болса, 
онда ол антибиотиктерге резистентті болып табылады (нәтижесі 
бақылаудағы ӛсінділермен салыстырылу арқылы бағаланады). 

жүктеу/скачать 5,08 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: