О книге Special for Dabl-v aka Эукариот Фрида Карловна Черкес, Лина Борисовна Богоявленская, Наталья Александровна Бельская – Микробиология

Глава 7. Питательные среды и микробиологическое 
исследование - Г. И. Кац 
Микробиологическое исследование - это выделение чистых культур 
микроорганизмов, культивирование и изучение их свойств. Чистыми 
называют культуры, состоящие из микроорганизмов одного вида. Они нужны 
при диагностике инфекционных болезней, для определения видовой и типовой 
принадлежности микробов, в исследовательской работе, для получения 
продуктов жизнедеятельности микробов (токсинов, антибиотиков, вакцин и т. 
п.). 
Для культивирования микроорганизмов (выращивание в искусственных 
условиях in vitro) необходимы особые субстраты - питательные среды. На 
средах микроорганизмы осуществляют все жизненные процессы (питаются, 
дышат, размножаются и т. д.), поэтому их еще называют средами для 
культивирования. 
Питательные среды 
Питательные среды являются основой микробиологической работы, и их 
качество нередко определяет результаты всего исследования. Среды должны 
создавать оптимальные (наилучшие) условия для жизнедеятельности 
микробов. 
Требования, предъявляемые к средам 
Среды должны соответствовать следующим требованиям: 
1) быть питательными, т. е. содержать в легко усвояемом виде все вещества, 
необходимые для удовлетворения пищевых и энергетических потребностей. 
Ими являются источники органогенов и минеральных (неорганических) 
веществ, включая микроэлементы. Минеральные вещества не только входят в 
структуру клетки и активизируют ферменты, но и определяют физико-
химические свойства сред (осмотическое давление, рН и др.). При 
культивировании ряда микроорганизмов в среды вносят факторы роста - 
витамины, некоторые аминокислоты, которые клетка не может синтезировать; 
Внимание! Микроорганизмы, как все живые существа, нуждаются в 
большом количестве воды. 
2) иметь оптимальную концентрацию водородных ионов - рН, так как 
только при оптимальной реакции среды, влияющей на проницаемость 
оболочки, микроорганизмы могут усваивать питательные вещества. 
Для большинства патогенных бактерий оптимальна слабощелочная среда 
(рН 7,2-7,4). Исключение составляют холерный вибрион - его оптимум 

находится в щелочной зоне (рН 8,5-9,0) и возбудитель туберкулеза, 
нуждающийся в слабокислой реакции (рН 6,2-6,8). 
Чтобы во время роста микроорганизмов кислые или щелочные продукты их 
жизнедеятельности не изменили рН, среды должны обладать буферностью, т. 
е. содержать вещества, нейтрализующие продукты; обмена; 
3) быть изотоничными для микробной клетки; т. е. осмотическое давление 
в среде должно быть таким же, как внутри клетки. Для большинства 
микроорганизмов оптимальна среда, соответствующая 0,5% раствору натрия 
хлорида; 
4) быть стерильными, так как посторонние микробы препятствуют росту 
изучаемого микроба, определению его свойств и изменяют свойства среды 
(состав, рН и др.); 
5) плотные среды должны быть влажными и иметь оптимальную для 
микроорганизмов консистенцию; 
6) обладать определенным окислительно-восстановительным потенциалом, 
т. е. соотношением веществ, отдающих и принимающих электроны, 
выражаемым индексом RH
2
. Этот потенциал показывает насыщение среды 
кислородом. Для одних микроорганизмов нужен высокий потенциал, для 
других - низкий. Например, анаэробы размножаются при RH
2
не выше 5, а 
аэробы - при RH
2
не ниже 10. Окислительно-восстановительный потенциал 
большинства сред удовлетворяет требованиям к нему аэробов и 
факультативных анаэробов; 
7) быть по возможности унифицированным, т. е. содержать постоянные 
количества отдельных ингредиентов. Так, среды для культивирования 
большинства патогенных бактерий должны содержать 0,8-1,2 г/л аминного 
азота NH
2
, т. е. суммарного азота аминогрупп аминокислот и низших 
полипептидов; 2,5-3,0 г/л общего азота N; 0,5% хлоридов в пересчете на натрия 
хлорид; 1% пептона. 
Желательно, чтобы среды были прозрачными - удобнее следить за ростом 
культур, легче заметить загрязнение среды посторонними микроорганизмами. 
Классификация сред 
Потребность в питательных веществах и свойствах среды у разных видов 
микроорганизмов неодинакова. Это исключает возможность создания 
универсальной среды. Кроме того, на выбор той или иной среды влияют цели 
исследования. 
В настоящее время предложено огромное количество сред* в основу 
классификации которых положены следующие признаки. 

1. 

жүктеу/скачать 14,39 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: