Получение дефибринированной крови

Получение цитратной крови. К крови добавляют вещество, 
предотвращающее ее свертывание, - 5% раствор натрия цитрата в 
соотношении 1:10 (на 10 мл крови 1 мл 5% раствора натрия цитрата). 
Получение плазмы. Жидкую часть крови получают из цитратной крови, 
которую центрифугируют или ставят в холодильник на 18-20 ч. В результате 
над осадком образуется слой жидкости желтоватого цвета - плазма. 
Получение сыворотки крови (см. главу 12). 
Получение взвеси эритроцитов. Взвесь эритроцитов получают из цельной 
и дефибринированной крови. 
Кровь центрифугируют в течение 15-20 мин при 2000-3000 об/мин. 
Эритроциты оседают на дно, образовавшуюся над ними желтовато-красную 
жидкость сливают, а в пробирки добавляют стерильный изотонический 
раствор натрия хлорида до первоначального объема и вновь центрифугируют. 
Такое промывание эритроцитов производят 2-3 раза, пока надосадочная 
жидкость не станет совершенно бесцветной. Последнюю порцию 
надосадочной жидкости удаляют, а в пробирке остается взвесь эритроцитов, 
которую можно использовать в течение 2-3 дней. Для сохранения эритроцитов 
в течение более длительного срока их подвергают обработке формалином. Для 
получения 50% взвеси к одному объему эритроцитов добавляют два объема 
буферного раствора, имеющего рН 7,2, и при постоянном помешивании такое 
же количество 3% раствора формалина. Полученную смесь выдерживают на 
водяной бане при 37° С 2-3 ч, помешивая ее каждые 15-20 мин, а затем в 
термостате (всего 20 ч при 37° С). На следующий день смесь центрифугируют 
в том же растворе, сливают надосадочную жидкость, а осадок доводят до 
первоначального объема буферным раствором, разливают по флаконам, 
плотно закрывают и хранят при 4° С. 
Контрольные вопросы 
1. Какова техника взятия крови у кроликов, морских свинок, крыс, мышей и 
какие из них чаще служат донорами? 
2. Что такое тотальное кровопускание? 
3. Какие максимальные количества крови можно получить от лабораторных 
животных при одномоментном и тотальном кровопускании? 
4. Как получить нитратную и дефибринированную кровь и составные части 
крови: плазму, сыворотку, взвесь эритроцитов? 
Задание 
Возьмите пробирку с кровью и получите из нее сыворотку. 

жүктеу/скачать 14,39 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: