Cetraria и Cladonia
[6,7].
Целью данной работы было изучение антиоксидантных и
антибактериальных свойств водно-спиртовых экстрактов лишайников
Cetraria islandica
и
Cladonia arbuscula
в зависимости от концентрации
разведения.
Материал и методы.
В качестве исследуемого материала были взяты 40% водно-спиртовые
экстракты лишайников
Cetraria islandica
и
Cladonia arbuscula
в разных
соотношениях (масса сырья/количество экстрагента) (табл.1)
Таблица 1
Варианты экстракции лишайникового сырья
Вариант Масса сырья
(г)
Экстрагент
(мл)
Вариант
Масса сырья
(г)
Экстрагент
(мл)
Cetraria islandica
Cladonia arbuscula
№1
1
100
№7
1
100
№2
1
80
№8
1
80
№3
1
60
№9
1
60
№4
1
40
№10
1
40
№5
1
20
№11
1
20
№6
1
4
№12
1
4
В приготовленных нами экстрактах использовались разные варианты
разведения
из
слоевищ
лишайников.
Измельченные
слоевища
544
экстрагировали в 40%-ом водно-спиртовом растворе в течение 10 дней [5],
а также согласно методике в 96% спирте в течение суток [8].
Антиоксидантные свойства определяли по количеству низкомолекулярных
антиоксидантов (НМАО) по окислению хлорного железа (III) до
хлористого железа (II), количество которого определяли по интенсивности
окраски при добавлении о-фенантролина. Содержание аскорбиновой
кислоты определяли по методике [3].
Антибактериальные свойства определяли по чувствительности
условно-патогенных и патогенных штаммов:
Staphylococcus aureus,
Streptococcus pyogenes, E.coli Enterobacter cloacea
. Чистые культуры
равномерно засевали в мясо-пептонном агаре. На поверхности засеянного
агара раскладывали диски с пропитанными водно-спиртовыми
экстрактами кладонии и цетрарии — по 5 дисков на каждую чашку на
расстоянии 25 мм от центра чашки. Чашки с содержимым выдерживали
при температуре 37ºС на 16-18 часов, после чего фиксировали результаты
путем измерения зон задержки роста бактерий вокруг дисков, включая
диаметр самого диска. Для контроля ставили стандартные диски,
пропитанные антибиотиками пенициллин и оксациллин. При зоне
задержки роста до 10 мм отмечаем устойчивость бактерий к экстракту, при
11-15 мм — малочувствительные к экстракту, при 15-25 мм — как
чувствительные к экстракту[9].
Результаты и обсуждение.
При изучении антиоксидантной активности в водно-спиртовых
вытяжках лишайников кладонии и цетрарии в зависимости от разведения
1:100; 1:80; 1:60; 1:40; 1:20; 1:4 были получены следующие результаты.
Наибольшее содержание НМАО наблюдается в экстракте цетрарии в
соотношении 1:4 (1,28 мкэкв/г), а в экстракте из кладонии — в
соотношении 1:80 (1,16 мкэкв/г). При этом содержание НМАО по
методике в 1 г сухой массы слоевища цетрарии составило 0,56 мкэкв/г,
545
а в кладонии — 0,82 мкэкв/г. Т.е. антиоксидантная активность по
содержанию НМАО в исследованных лишайниках выше в приготовленных
нами экстрактах, чем в сухом сырье (по методике): в экстракте кладонии
— в 1,4 раза, в экстракте цетрарии — в 2,3 раза больше в водно-
спиртовой вытяжке (рис.1).
Наибольшее содержание аскорбиновой кислоты выявлено в водно-
спиртовых вытяжках и цетрарии, и кладонии при соотношении 1:20, хотя
примерно такое же содержание отмечается при соотношениях 1:4 и 1:80
(рис.2). Содержание аскорбиновой кислоты в 1 г сухого сырья по
стандартной методике также оказалось намного ниже, чем в водно-
спиртовых вытяжках — в слоевище цетрарии в 4,6 раз (5,6 мг/г), и в
слоевище кладонии в 6,4 раза (4,4 мг/г).
546
При определении антибактериальных свойств лишайников к условно-
патогенным штаммам было установлено, что
E.coli
малочувствительны к
приготовленным экстрактам лишайников, а
Staphylococcus aureus и
Streptococcus pyogenes
проявили устойчивость, хотя контрольные
антибиотики вызвали еще более слабый лизис этих бактерий. Наибольшая
степень лизирования
E.coli
под действием экстракта
Cetraria islandica
происходит при разведении 1:4 (12 мм), что соответствует действию
оксациллина (12 мм) и эффективнее действия пенициллина (7мм) (табл.2,
табл.3). Затем схожие результаты получены при разведениях 1:80, 1:60 и
1:40 (10 мм), что также эффективнее пенициллина, но уступает действию
оксациллина. Антибактериальное действие водно-спиртовых вытяжек
Cladonia arbuscula
на
E.coli
было более значительным по сравнению с
экстрактами Cetraria islandica при разведении 1:60 и 1:4 (табл.3). На
Staphylococcus aureus
и
Streptococcus pyogenes
40% спиртовые экстракты
исследованных лишайников вызывали слабый лизис. При этом действие
экстрактов на
Staphylococcus aureus
было таким же, как действие
антибиотиков при разведениях 1:20, 1:60, 1:80 и эффективнее
547
антибиотиков — при разведении 1:4. А на штаммы
Streptococcus pyogenes
экстракты лишайников в целом действовали слабее, чем антибиотики.
Таблица 2
Чувствительность микробов к антибиотикам (мм)
Пениц
илин
8
10
7
Оксаци
ллин
8
10
12
Таблица 3
Чувствительность микробов к экстрактам лишайников
Cetraria islandica и Cladonia arbuscula
(мм)
Разве
дение
Staphyloc
occus aureus
Streptoc
occus
pyogenes
E.c
oli
Cetraria islandica
1:100
6
7
6
1:80
7
9
10
1:60
9
0
10
1:40
7
0
10
1:20
8
8
8
1:4
11
11
12
Cladonia arbuscula
1:100
6
7
6
1:80
8
9
10
1:60
7
9
12
1:40
7
0
7
1:20
8
11
7
548
1:4
13
12
13
Таким образом, в нашей работе наиболее выраженные
антибактериальные и антиоксидантные свойства лишайников
Cetraria
islandica
и
Cladonia arbuscula
при приготовлении экстракта в 40% спирте
проявились в соотношении масса сырья/количество экстракта - 1:4.
Также соразмерное с антибиотиками оксациллин и пенициллин угнетение
роста условно-патогенных штаммов бактерий происходило и при
разведениях 1:20, 1:80. Кроме этого, можно отметить, что при данных
условиях исследования антибактериальное действие
Cladonia arbuscula
было в целом эффективнее по сравнению с
Cetraria islandica
.
Использованная литература
1.
Крамаренко Г.В., Люта М.Л., Чолий Л.Ф., Рапак С.В.//Провизор, выпуск №19.
2003. – Режим доступа:
http://www.provisor.com.ua
свободный. – Загл. с экрана.
2.
Литвинов М.А., Рассадина К.А. Экспериментальное изучение антибиотических
свойств лишайников, произрастающих в СССР//Бот.журнал.1958.- Т.43, №4.-С.556-561.
3.
Максимов Г.Б., Полевой В.В. Методы биохимического анализа
растений. Л.:1978. -192с.
4.
Моисеева Е.Н. Биохимические свойства лишайников и их
практическое значение. Академия наук СССР.- М., 1961.-82с.
5.
Павлов Н.Г., Кершенгольц Б.М., Филлипова Г.В., Шашурин М.М. Влияние
экстрактов слоевищ лишайников на биологические свойства микобактерий
тубуркулеза//Вестник СВФУ. Якутск,-2012.- Том 19,№4.-С.145-150.
6.
Соловьева
М.И.,
Кузьмина
С.С.,
Федотова
М.П.Антиоксидантное и
иммуномодулирующее действие лишайника Cladina при коррекции сахарного
диабета//Наука и образование. Якутск,- 2006.- №2. - С.93-96
7.
Соловьева М.И., Кудинова З.А., Кузьмина С.С. Содержание микроэлементов в
слоевищах лишайников родов Cladonia и Cetraria в зависимости от мест
произрастания//Наука и образование. Якутск,- 2007.- №3.-С.118-122.
549
8.
Рогожин В.В. Методы биохимических исследований. Учебное пособие.-Якутск,
1999.-113с.
9.
Черкес Ф.К., Богоявленская Л.Б., Бельская Н.А. Микробиология. М.: Медицина,
1986.-512с.
УДК 332.8(571.56)
Достарыңызбен бөлісу: |