Микробиология
жүктеу/скачать 5,08 Mb. Pdf көрінісі
|
BulashevAK BMB.pdf
- Бұл бет үшін навигация:
- 50-сурет. Вирустардың жасушаларды зақымдауы (цитопатогенді әсер етуі) 51-сурет. Вирустардың телімді антиденелермен бейтараптануы
- (цитопатогенді әсерінің болмауы)
| – –
– – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – 2 5 Сау мал қан сарысуы 1:10 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + – – – – – – – – – – 7 – Физиологиялық ерітінді + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + – – – – – – – 7 – Ол ҥшін телімді қан сарысуы мен сау мал қан сарысуын бір сҧйылтымда (1:10) дайындайды және ҥш қатарға сҧйылтымы 10 есе кӛбейіп отыратын вирусты 0,5 мл-ден шыны тҥтіктерге ҥлестіреді. Вирустарды бейтараптау индексін дҧрыс есептеу ҥшін зерттеуге алынған вирустың ең соңғы сҧйылтымы оның биологиялық титрінен 50-сурет. Вирустардың жасушаларды зақымдауы (цитопатогенді әсер етуі) 51-сурет. Вирустардың телімді антиденелермен бейтараптануы (цитопатогенді әсерінің болмауы) 127 артық болуы қажет. Мысалы, вирус титрі 10 -7 ӘБ 50 болса, онда зерттеуге вирусты 10 -8 сҧйылтымына дейін алу керек. Бірінші қатардағы шыны тҥтікшелерге 1:10 сҧйылтымындағы телімді қан сарысуын 0,5 мл, екінші қатардағыларға – сау мал қан сарысуларын (антиденелері жоқ) 0,5 мл, ал ҥшінші қатардағыларға – физиологиялық ерітіндіні 0,5 мл-ден қосады. Бірдей кӛлемде (1:1) ҥлестірілген қан сарысулары мен вирус қоспаларын жақсылап шайқағаннан кейін, бір-бірімен әрекеттесу ҥшін қажетті уақыт пен температурада ҧстайды (вирустың тҥріне байланысты). Инкубация уақыты ӛткеннен кейін қан сарысуы мен тҥрлі сҧйылтымдағы қоспаны жасуша ӛсінділері немесе басқа да вирусқа сезімтал жҥйелері бар 4 шыны тҥтіктерге 10 -8 сҧйылтымнан бастап (10 -8 , 10 -7 , 10 -6 , 10 -5 ) 0,2 мл-ден қосады. Жасуша ӛсінділері бар шыны тҥтіктерді +37ºС термостатта 60-90 минут ҧстағаннан кейін, оларға 1 мл- ге дейін қоректік орта қосып, кҥнделікті микроскопиялау арқылы термостатта ҧстайды. Белгілі бір уақыт ӛткеннен кейін (5-12 тәулік) реакция нәтижесін оқиды. Бастапқыда вирустың титрін Рид және Менч әдісімен есептейді. Сау мал қан сарысуы бар тҥтіктермен салыстыра отыра, телімді қан сарысулары вирустардың титрін қандай деңгейге дейін тӛмендететіндігін бейтараптау индексі (Ig) деп атайды. Бейтараптау индексі келесі формуламен есептеледі: БИ = Т 1 = 10 7 = 105 = 100000, Т 2 10 2 мҧнда Т 1 – сау мал қан сарысуы бар вирустың титрі; Т 2 – телімді қан сарысуы бар вирустың титрі. Бейтараптау индексі 2 Ig және одан жоғары немесе сандық есептеуде 100 және одан жоғары болғанда реакция оң деп есептеледі. Бейтараптау индексі 1 ден 2 дейін болған жағдайда реакция кҥдікті деп есептеліп, реакцияны қайта қояды. Бейтараптау индексі 1 ден тӛмен болғандарын теріс нәтиже деп есептейді. Бейтараптау реакциясында бір сҧйылтымдағы вирустар мен әр тҥрлі сҧйылтымдағы қан сарысуларын жиі жағдайда зерттеуге алынған антиденелерді идентификациялау және олардың қҧрамында белгілі бір вирусқа қарсы антиденелердің бар екендігін, вирустарды бейтараптай алатын титрін анықтау ҥшін қолданады. жүктеу/скачать 5,08 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|