Глава 21. ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ
СТЕРОИДНЫХ ГОРМОНОВ И ИНСУЛИНА
259
необходимы.
6 этап. Проводят сепарацию путем центрифугирования. Клетки
лизируют ультразвуком, выделяют А и В цепи, которые связаны с
бетагалактозидазой. Обрабатывают бромцианом для отщепления А и В-
цепи от бетагалактозидазы. Затем производят дальнейшую очистку и
выделение А и В цепей. Очистку проводят высаливанием и многократной
перекристаллизацией, для получения монопиковых и мнокомпонентных
инсулинов
дополнительно
могут
очищать
гель-хроматографией,
ионообменной
хроматографией
и
методом
молекулярных
сит
соответственно.
7 этап. Окисляют остатки цистеина для образования дисульфидных
связей, в результате цепи связываются и получается человеческий
рекомбинантный инсулин.