Обогащение материала – концентрация возбудителя в меньшем объеме исследуемого материала: • Метод гомогенизации и центрифугирования в присутствии NaOH
• Метод флотации с ксилолом
Методы диагностики 1. Экспресс-диагностика
ПЦР
2. Микроскопический метод
• Окраска нативного исследуемого материала по Цилю-Нильсену
• Окраска нативного и обогащенного материала люминесцирующими красителями (аурамином)
Обнаружение в мазках микобактерий дает основание для постановки предварительного диагноза
3. Бактериологический метод
Является обязательным
I этап: посев обогащенного исследуемого материала, предварительно обработанного кислотой и
нейтрализованного щелочью на питательные среды
• среда Сотона
• среда Левенштейна-Йенсена
• среда Финна
• среда «Новая»
II этап: изучение выросших колоний по культуральным, морфологическим и тинкториальным свойствам
III этап: идентификация чистой культуры по биохимическим свойствам
• Тест на каталазную активность (позволяет отличить M. tuberculosis и M. bovis от других
микобактерий)
• Ниациновая проба (ниациновый тест, проба Кона) (позволяет отличить M. tuberculosis от M. bovis)
• Восстанавление нитратов в нитриты (позволяет отличить M. tuberculosis от M. bovis)
4. Биологический метод
• Производят заражение лабораторных животных исследуемым материалом от больного
• К M. tuberculosis чувствительны морские свинки
• К M. bovisчувствительны кролики
• Учет через 3-4 месяца 5. Метод кожно-аллергических проб
• Проба Манту (в основе лежит ГЗТ)
• Проводится внутрикожно с аллергеном (туберкулин)
• Туберкулин – очищенный белок из микобактерий туберкулеза -Alt 1890,PPD 1934Сейберт, ППД-Л
(Линниковой), Диаскинтест (аллерген туберкулезный рекомбинантный)
• Учет через 72 часа
• Отрицательная (до 5 мм)
• Нормэргическая (5-16 мм)
• Гиперэргическая (более 17 мм)
• Учет по туберкулиновому ряду в динамике
• Об инфицированиисудят по виражутуберкулиновой пробы
6. Ускоренный метод диагностики Метод Прайса (метод микрокультур)
• На стекло наносится обогащенный исследуемый материал, предварительно обработанный
кислотой и нейтрализованный щелочью
• Вертикально погружается в цитратную кровь на 10-14 дней
• Сушится
• Фиксируется
• Окрашивается по Цилю-Нильсену
В иммерсионный микроскоп видны микобактерии в виде кос или нитей войлока (наличие у
патогенных микобактерий корд-фактора)