Фотометрические методы определения аналитов. Измерение по
калибровочной кривой
Для построения калибровочных графиков используют несколько
концентраций определяемого вещества, изготовленного в качестве
110
калибратора с разным уровнем концентрации, определенной точным
референтным методом. На оси абсцисс откладывается концентрация, а на оси
ординат – абсорбция. Если закон светопоглощения соблюдается, график
будет иметь вид прямой линии, проходящей через нулевую точку (рис. 2.3,
график А).
С
1
С
2
С
3
С
4
С
5
Рис. 2.3. Варианты при построении калибровочного графика при линейной
зависимости экстинкции от концентрации исследуемого вещества:
А – закон Бугера-Ламберта-Бера соблюдается, прямая выходит из нулевой точки,
правильный вариант калибровочного графика
Б – имеет место влияние систематического фактора, желательно измерение по
сравнению с холостой пробой, в которой бы этот фактор учитывался.
В – измерение неверное, низкие концентрации вещества не измеряются
Возможны варианты при построении калибровочного графика. Если
получается график Б (см. рис. 2.3), то использовать его можно, но имеется
систематический сдвиг, который необходимо учитывать при расчете
фактора. Если получается график В, то пользоваться им нельзя, так как не
определяются по этому графику низкие концентрации калибратора. Расчеты
по калибровочным графикам обычно используют для методов, при которых
имеются стабильные результаты изо дня в день (гемоглобин, общий белок).
При работе на современных анализаторах оператору фактически приходится
проводить калибровку каждый день, при этом построение и использование
аб
со
р
б
ция
В
Б
А
111
графиков осуществляется автоматически. Для каждого прибора необходимо
проводить свою калибровку.
Достарыңызбен бөлісу: |
