Глава
9.КУЛЬТИВИРОВАНИЕ
ИЗОЛИРОВАННЫХ
КЛЕТОК
ЧЕЛОВЕКА И ЖИВОТНЫХ
101
Первичная культура. Источником этой культуры являются органы,
экспланты или клетки, непосредственно извлеченные из организма. Клетки
гетерогенны и характеризуются низкой пролиферативной способностью. К
такой культуре также относятся опухолевые клетки, образованные
культивированными клетками, введенными в организм животных.
Перевиваемая культура – культура, подвергавшаяся переносу из
одного сосуда в другой. Это обеспечивает возможность продления
существования культуры, клонирования, исследования и сохранения
свойств клеток. После нескольких пересевов клеточная линия либо гибнет,
либо трансформируется и становится постоянной клеточной линией.
9.2 Условия и способы культивирования животных клеток
Условия культивирования клеток животных К условиям, способствующим размножению клеток, относятся их
низкая плотность, невысокая концентрация Ca
2+
, присутствие ростовых
факторов.
Высокая плотность клеток (выше 10
5
клеток на 1 см
2
) и
концентрация Ca
2+
(300–1500 мкмоль), присутствие индукторов
дифференциации (гормоны, например, гидрокортизон; ретиноиды),
полярные растворители (диметилсульфоксид) способствуют прекращению
клеточного деления и индуцируют дифференциацию клеток.
Факторы, влияющие на скорость деления клеток 1) специфические (например, фибробласты реагируют на фактор
роста фибробластов). Используют специфические вещества, которые
влияют только на определенный вид клеток.
2) неспецифические (гормоны и их аналоги – инсулин,
гидрокортизон, дексаметазон, эстрадиол, тестостерон, прогестерон,
трийодтиронин). Эти факторы вызывают деление любых клеток.
Способы культивирования клеток животных В зависимости от соотношения с поддерживающим субстратом
(культуральная среда) выделяют монослойные и суспензионные культуры.
Монослойная культура субстрат-зависимая и клетки могут расти только до
полного закрытия поверхности и если поверхности нет, то клетки не
