Учебное пособие по химии для самостоятельной работы студентов медицинских вузов Рекомендуется для студентов, обучающихся по специальностям
жүктеу/скачать 1,06 Mb.
|
Физико-химические методы (1)
| В жидкостной хроматографии подвижной фазой служит жидкость, а неподвижной фазой твёрдый гранулированный адсорбент. Жидкостную хроматографию применяют для разделения органических и неорганических веществ, в том числе и термически неустойчивых, а также веществ с большой молекулярной массой.
В классическом варианте жидкостной хроматографии, который отличается простотой аппаратурного оформления, жидкость (раствор) самотёком пропускают через колонку, собирая отдельные порции на её выходе. Более современный вариант высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) использует прокачку жидкой фазы через колонку с помощью специального насоса; по своему оформлению ВЭЖХ похожа на газовую хроматографию. Этот метод хроматографии позволяет проводить микроколичественный анализ веществ в ультрамалых количествах и за короткое время с использованием высокочувствительных детекторов в микроколоночном варианте. Метод широко применяется для анализа белков, производных аминокислот и других соединений, определения следовых количеств пестицидов и полиароматических углеводородов, в анализе пищевых продуктов и фармацевтических препаратов. Разновидностью жидкостной хроматографии является жидкостно-жидкостная хроматография, в которой подвижной фазой служит жидкость, а неподвижной тонкий слой жидкого адсорбента, нанесённый на твёрдый носитель. По применяемой технике жидкостную хроматографию делят на колоночную, тонкослойную и бумажную. В колоночной хроматографии собирают отдельные порции элюата на выходе из колонки, заполненной твёрдым гранулированным носителем. Хроматограмму получают с помощью разнообразных детекторов, измеряющих различные физические свойства жидкой фазы (электропроводность, оптическую плотность и др.). Колонка для адсорбционной хроматографии представляет собой трубку, заполненную адсорбентом. На адсорбент в колонке наносят смесь веществ. Затем через них пропускают растворитель или смесь растворителей, служащих подвижной фазой. Разделение основано на том, что вещества с более высоким эффективным коэффициентом распределения продвигаются на колонке с большей скоростью, отделяясь таким образом от веществ более низким коэффициентом. Для получения адсорбционных хроматограмм применяют растворители, обладающие слабой адсорбируемостью на применяемых адсорбентах. При выборе растворителя руководствуются правилом Ребиндера, согласно которому неполярные адсорбенты лучше адсорбируют неполярные адсорбаты из полярных растворителей (воды или спирта); полярные же адсорбенты лучше адсорбируют полярные адсорбаты из неполярных растворителей (гексана или бензола). В настоящее время жидкостно-адсорбционная хроматография на колонке применяется при разделении и изучении состава углеводов, фенолов, углеводородов, липидов, стероидов, производных аминокислот, компонентов нуклеиновых кислот, алкалоидов, пестицидов, витаминов и других веществ. жүктеу/скачать 1,06 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|