Условия культивирования бактерий

61 
• Атмосфера культивирования. Для роста и размножения строгих аэробов необходим 
кислород. Аэробы хорошо растут на поверхности агара на чашках Петри или в тонком верхнем 
слое жидкой среды. Для обеспечения роста и размножения строгих аэробов в глубинных слоях 
жидкой среды необходимо диффузное распределение кислорода по всему объему питательной 
среды. Это достигается непрерывным перемешиванием или встряхиванием питательной среды, 
т.е. аэрированием. Аэрирование осуществляется на специальных аппаратах - встряхивателях. 
Для культивирования 
факультативных анаэробов 
используют те же методы, так как в 
присутствии кислорода у них преобладает оксидативный метаболизм над ферментацией как 
наиболее энергетически выгодный. 
Микроаэрофилы 
размножаются при пониженном парциальном давлении кислорода. Этого 
можно достичь повышением парциального давления СО
2
в атмосфере культивирования до 1-5% 
против 0,03% СО
2
в атмосфере воздуха. Для этих же целей используют специальные СО
2
-
инкубаторы или же посевы помещают в эксикаторы, в которых устанавливают горящую свечу. 
Облигатные анаэробы 
для своего роста и размножения требуют исключения доступа 
кислорода воздуха. Это достигается следующими мерами: 
- добавлением к питательным средам редуцирующих кислород веществ: тиогликолевой и 
аскорбиновой кислот, цистеина, сульфидов; 
- регенерацией от кислорода воздуха жидких питательных сред путем их кипячения с 
последующим плотным закупориванием сосудов, в которые налиты среды, резиновыми пробками; 
- использованием поглотителей кислорода, щелочного пирогаллола, и других средств, 
помещая их в герметически закрываемые емкости газ-паки. Этот метод используется для 
культивирования аэротолерантных бактерий; 
- механическим удалением кислорода воздуха с последующим заполнением емкости 
инертным газом (для этих целей используют анаэростаты и анаэробные боксы). 
Для культивирования хемо- и фотоавтотрофных бактерий создается атмосфера, 
насыщенная СО
2
. 
• Время культивирования зависит от времени генерации. Большинство бактерий 
культивируют для получения видимого роста в течение 18-48 ч. Для культивирования возбудителя 
коклюша требуется 5 сут, для культивирования 
М. tuberculosis - 
3-4 нед. 
• Освещение. Для выращивания фототрофных микроорганизмов необходим свет. 
Некоторые условно-патогенные микобактерии в зависимости от освещенности образуют пигмент, 
что используется при их идентификации. Культивирование абсолютных внутриклеточных 
паразитов, бактерий, относящихся к родам 
Rickettsia, Ehrlichia, Coxiella, Chlamydia, 
осуществляют 
на культурах клеток или в организме животных и членистоногих, а также в куриных эмбрионах (за 
исключением эрлихий). Куриные эмбрионы используют также для культивирования бактерий, 
обладающих высоким уровнем гетеротрофности, например родов 
Borrelia, Legionella.

жүктеу/скачать 4,99 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: