1. Биологиялық нысандарды зерттеудің кеңінен таралған классикалық әдістеріне жалпы сипаттама беріңіз
жүктеу/скачать 45,44 Kb.
|
1 2
|
БАҚЫЛАУ ЖҰМЫСЫ №26,27 1. Биологиялық нысандарды зерттеудің кеңінен таралған классикалық әдістеріне жалпы сипаттама беріңіз. 2. Гель электрофорез әдісінің теориялық негіздеріне түсініктеме беріңіз. 3. Газдық хроматографияның принциптік сызбасы. Хроматографтың блок-сызбасын келтіріңіз. Жауабы:
• қараңғы өріс микроскопиясы-өте кішкентай құрылымдарды (0,2 мкм-ден аз) зерттеу үшін қолданылады. Әдіс кәдімгі микроскопиямен көрінбейтін шағын құрылымдар шағылысқан сәулелерде жарқырауына негізделген. • флуоресцентті микроскопия-кейбір заттар мен құрылымдардың жарық энергиясын жұту кезінде жарқырау (флуоресценция, люминесценция) қабілеттілігіне негізделген. • цито- және гистохимия-тіндер мен жасушалардың құрылымын сақтай отырып, олардың химиялық құрамын зерттеу үшін, сондай-ақ химиялық заттардың локализациясын анықтау үшін қолданылады • цитоспектрофотометрия-Арнайы құрылғы (микроспектрофотометр) көмегімен цито- және гистохимиялық әдістермен (нуклеин қышқылдары, белоктар, көмірсулар, ферменттер) боялған субстраттардың оптикалық тығыздығы өлшенеді. 2. Гельдік электрофорез – ДНҚ фрагменттерін өлшемі бойынша бөлу әдісі. ДНҚ үлгілері гельдің бір шетіндегі шұңқырларға (шұңқырларға) орналастырылады, содан кейін гель арқылы электр тогы өтеді. ДНҚ фрагменттері теріс зарядталған, сондықтан олар оң электродқа қарай жылжиды. Әдістің қолданылуының бірі - плазмидтік ДНҚ-ны зерттеу. Ол әдетте сақиналы болып табылады және екінші реттік құрылымдарды құрайды, мысалы, супер орамға айналдыру. Осылайша, плазмиданың өлшемін анықтау үшін екінші реттік құрылымның элементтерін жою қажет. Ол үшін гельге қолданар алдында плазмидті «сызықты етеді» (сызықтық жасайды), яғни рестриктазалардың бірімен (эндонуклеазалар) өңделеді. Рестриктаза плазмиданы тек бір жерде кесетіндей етіп таңдалады. Барлық ДНҚ молекулаларының массасына шаққанда бірдей заряд мөлшері болады. Осыған байланысты гельдік электрофорез кезінде ДНҚ фрагменттерін бөлу процесі тек олардың мөлшеріне сәйкес жүреді. Электрофорездің көмегімен үлгіде қанша түрлі ДНҚ фрагменттері бар екенін және олардың бір-біріне қатысты өлшемдерін көре аламыз. Сонымен қатар біз ДНҚ фрагментінің абсолютті өлшемін белгілі ұзындықтағы ДНҚ фрагменттерінен тұратын стандартты маркермен салыстыру арқылы анықтай аламыз. 3.Газды хроматография принципі бойынша бағанды хроматографияға ұқсас (хроматографияның басқа түрлері сияқты, мысалы, HPLC), бірақ бірнеше маңызды айырмашылықтары бар. Біріншіден, қоспадағы қосылыстарды бөлу процесі сұйық стационарлы фаза мен жылжымалы газ фазасы арасында жүреді, ал бағанды хроматографияда стационарлы фаза қатты, ал жылжымалы фаза сұйық болып табылады. Демек, процедураның толық атауы - «Газ-сұйық хроматографиясы» - сәйкесінше мобильді және стационарлы фазаларды атайды. Екіншіден, баған газдың температурасын басқаруға болатын пеште орналасқан, ал әдеттегі бағанды хроматографияда температура бақылауы жоқ. Және үшіншіден, газ фазасындағы қосылыстың концентрациясы тек газдың бу қысымының функциясы. Сурет 1 - тасымалдаушы газ көзі (жылжымалы фаза) 2 - тасымалдаушы газ ағынының реттегіші 3 - үлгіні инъекциялау құрылғысы 4 – термостаттағы хроматографиялық баған 5 - детектор 6 - электронды күшейткіш 7 - жазу құрылғысы (магнитофон, компьютер) 8 - шығын өлшегіш жүктеу/скачать 45,44 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|
1 2