| Методы сохранения клеточных культур. Под анабиозом понимают способность биологических объектов обратимо приостанавливать или предельно затормозить процессы их жизнедеятельности. Выделяют следующие основные признаки анабиотического состояния: отсутствие или предельное затормаживание метаболизма; сохранение структуры в течение продолжительного времени; отсутствие в жидкой фазе заметных количеств свободной воды как непрерывной среды; повышенная устойчивость к экстремальным факторам; способность восстанавливать процессы жизнедеятельности.
Существует разные подходы к сохранению культур: криосохранение, замедление роста, сушка (распылительная и лиофильная) – широко применяемое в микробиологии для клеток микроорганизмов, в настоящее время неприемлемо для культур тканей высших растений.
Криосохранение - хранение в замороженном состоянии. Однако на практике обычно это хранение при очень низких температурах: при температуре сухого льда (-79 оС), в морозильниках с ультранизкой температурой (-80 оС и ниже), в парах (приблизительно -140 оС) или непосредственно в жидком азоте (-196 оС). Обычно его проводят в жидком азоте, при температуре -196 oC. Низкотемпературная консервация зависит от: вида и типа клеток; их концентрации в суспензии; состава среды для консервирования; вида и концентрации криопротектора; режима охлаждения и отогрева, а также способа реабилитации клеток после отогрева.
Достарыңызбен бөлісу: |
