Биоинженерияға кіріспе. Биоинженерияның негізгі түсініктері және молекулалық-генетикалық негіздері. Гендік-инженерлік технологиялар



бет3/7
Дата13.10.2022
өлшемі4,76 Mb.
#42707
1   2   3   4   5   6   7

4. Скрининг - адамның қалаған генін алып жүретін бактериялардың клондарының арасынан таңдау. Ол үшін барлық бактериялық колониялар арнайы сүзгімен жабылған. Оны алып тастаған кезде колониялардың ізі қалады, өйткені клондардың кейбір клеткалары сүзгіге жабысады. Содан кейін молекулалық будандастыру жүзеге асырылады. Сүзгілерді радиоактивті зондпен ерітіндіге батырады.

  • 4. Скрининг - адамның қалаған генін алып жүретін бактериялардың клондарының арасынан таңдау. Ол үшін барлық бактериялық колониялар арнайы сүзгімен жабылған. Оны алып тастаған кезде колониялардың ізі қалады, өйткені клондардың кейбір клеткалары сүзгіге жабысады. Содан кейін молекулалық будандастыру жүзеге асырылады. Сүзгілерді радиоактивті зондпен ерітіндіге батырады.
  • Зонд дегеніміз - мақсатты геннің комплементарлы бөлігінің полинуклеотиді. Ол тек қажетті генді қамтитын рекомбинантты плазмидалармен будандастырады. Будандастырудан кейін рентгендік фотопленка қараңғыда сүзгіге жағылады және бірнеше сағаттан кейін дамиды. Жарықтандырылған учаскелердің пленкадағы орналасуы трансформацияланған бактериялардың көптеген клондарының ішінде қажетті генімен плазмидалары барларды табуға мүмкіндік береді. Шектеу ферменттерін пайдаланып қажетті генді кесу әрдайым мүмкін емес. Сондықтан кейбір жағдайларда клондау процесі қажетті генді мақсатты түрде өндіруден басталады. Ол үшін м-РНҚ адам жасушаларынан оқшауланады, бұл осы геннің транскрипциялық көшірмесі болып табылады және фермент - кері транскриптаза көмегімен комплементарлы ДНҚ тізбегі синтезделеді. Содан кейін ДНҚ синтезіне шаблон ретінде қызмет еткен м-РНҚ РНҚ тізбегін ДНҚ тізбегімен жұптастыра гидролиздеуге қабілетті арнайы ферменттің әсерінен жойылады. Қалған ДНҚ тізбегі екінші ДНҚ тізбегін толықтыратын кері транскриптаза арқылы синтездеуге шаблон ретінде қызмет етеді. Пайда болған ДНҚ-ның қос спиралы с-ДНҚ (комплементарлы ДНҚ) деп аталады. Ол кері транскриптаза жүйесіне түскен i-РНҚ оқылған генге сәйкес келеді. Бұл с-ДНҚ бактерияларды трансформациялау және тек таңдаулы адам гендерінен тұратын клондар алу үшін қолданылатын плазмидаға енгізілген.


Достарыңызбен бөлісу:
1   2   3   4   5   6   7




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет