Литература
1.
Есенеев Т.К. Технология производства, переработки и экспертиза
качества продукции животноводства. Кокшетау. КГУ.2004.
2.
Методические указания по применению научно-обоснованных
методов органолептической оценки качества мясных продуктов. В НИИМП. М.
1975.
3.
Частный П.М. мясо и мясные блюда. Изд. «Кайнар». Алма-Ата.1976.
Черекаева И.А.
4.
Есенеев Т.К. Нурмаганбетов К.Р. Есенеев А.Т. Маркетинг
производства и потребления продукции животноводства в РК. Теор. научно-
произв. Журнал. «Организатор производства».№ 3 (18). Россия. Воронеж.2003.
5.
Токсеитова Р. Состояние и пути развития животноводства. Газета
«Агрожаршы». № 11 (15) Қараша. 2007. Астана.
Түйін
Ет өнімдерінің биологиялық ерекшелігі жəне оның бəсекестігін бағалау.
А.Т.Есенеев – ізденуші, Ш.Ш.Уəлиханов атындағы мемлекеттік университет. Осы
мақалада эксперттік тəсілдермен ет өнімдерінің жеті көрсеткіш бойынша
ерекшелігі зерттелді. Ақмола облысындағы алты ет өнімдерін өңдейтін
мекемелердің бəсекестігі анықталып шешілді.
Summary
Biological characteristics and appraisal of meat production competitive ability.
Eseneev A.T. – candidate of Kokshetau State University named after Sh.
Ualikhanov.
The result of expert research of biological characteristics and quality rating of
meat production produced by Akmola region enterprises is the list of competitive
enterprises.
ВЛИЯНИЕ ФИТОПРЕПАРАТА «ТОПОЛИН» НА ПЕРЕВАРИМОСТЬ И
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПИТАТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ РАЦИОНОВ ГУСЯТАМИ
– БРОЙЛЕРАМИ ИТАЛЬЯНСКОЙ БЕЛОЙ ПОРОДЫ
Маутов Е.Э., соискатель
ТОО «Северо-Казахстанский НИИ
животноводства и растениеводства»
В условиях Северного Казахстана для кормления птицы в составе
кормосмеси широко используются ресурсы местного кормового сырья (пшеница,
ячмень, овес, отруби, рожь, просо, горох, рапс и др.), но в них содержатся в
значительном
количестве
некрахмальных
полисахаридов
(целлюлоза,
гемицеллюлоза, лигнин), а также пентозанов и бета-глюканов, которые в
желудочно-кишечном
тракте
птицы
образуют
высоковязкие
растворы,
увеличивающие объем и массу химуса, замедляющие скорость прохождения корма,
снижающие переваримость и усвоение питательных веществ кормосмесей [1].
В системе мер, направленных на повышение эффективности использования
кормов в птицеводстве, определенную роль отводят биологически активным
добавкам (БАД). В настоящее время в кормовую смесь вводят свыше 40
компонентов, причем 2/3 составляют вещества химического синтеза [2].
Сбалансированное кормление является основой выращивания хорошо
развитых высокопродуктивных гусят-бройлеров. Для поддержания жизни и
производства продукции птица должна получать достаточное количество энергии
комплекс питательных веществ. Усвоенные питательные вещества корма
используются птицей для построения органов и тканей или в качестве источника
энергии. В последнем случае питательные вещества окисляются, а освобождаемая
энергия расходуется на поддержание процессов жизнедеятельности и служит
источником энергии для роста молодняка [3].
Изучение переваримости питательных веществ является важным
показателем, по которому можно судить о процессах переваривания кормов.
Однако из главных проблем в использовании питательных веществ является
повышение степени переваримости кормов. Переваримость кормов была изучена в
ходе физиологического опыта, который был проведен на двенадцати гусятах (по
три гусенка с каждой группы) в возрасте 52 дней.
Гусята-бройлеры во время физиологического эксперимента потребили
практически одинаковое количество питательных веществ таблица 1.
Таблица 1 – Количество потребленных питательных веществ гусятами-бройлерами
в возрасте 52 дней (г, на голову в сутки), (
x
S
X
±
)
Группа
Показатель
Контрольная 1-опытная 2-опытная 3-опытная
Сухое
вещество
297,83±1,31 292,76±1,12 295,21±1,18 296.61±1,17
Органическое
вещество
278,37±1,28 278,99±1,28 275,67±1,26 276,48±1,25
Сырой
протеин
65,05±0,33 64,35±0,32 66,16±0,36 65,30±0,34
Сырая
клетчатка
15,05±0,11 14,47±0,10 14,28±0,09 14,25±0,09
Сырой жир 13,22±0,07 13,27±0,06 13,32±0,07 13,45±0,08
БЭВ 185,82±1,04
181,33±0,92
181,65±1,02 183,49±1,03
Важным показателем, характеризующим использование питательных
веществ, являются коэффициенты переваримости. Коэффициенты переваримости
питательных веществ комбикормов гусятами-бройлерами представлены в таблице
2.
Таблица 2 – Коэффициенты переваримости питательных веществ, % (
x
S
X
±
)
Группа
Показатель
Контрольная 1-опытная 2-опытная 3-опытная
Сухое
вещество
64,29±0,41 64,67±0,43 64,85±0,44 64,97±0,45
Органическое
вещество
67,86±0,43 68,09±0,44 68,23±0,45 68,23±0,45
Сырой
протеин
83,77 85.51 85,14 84,93
Сырая
клетчатка
45,47 48,69 49,37 50,20
Сырой жир 55,13
58,34
57,74
57,63
БЭВ 86,96 86,00 86.94 86.43
Коэффициент переваримости сухого вещества у гусят-бройлеров
контрольной группы меньше по сравнению со сверстниками опытных групп – на
0,39 %, 0,57 % и 0,70 %. Органическое вещество гусята-бройлеры контрольной
группы переваривали меньше опытных групп – на 0,24 %, 0,38 % и 0,38 %.
Коэффициент переваримости сырого протеина в 1-опытной группе – на 1,77 %, во
2-опытной – на 1,40 (Р<0,05), в 3-опытной – на 1,19 % больше, чем в контрольной.
С увеличением дозы фитопрепарата «Тополин» в рационе гусят-бройлеров
повышалась и переваримость сырой клетчатки: в 1-опытной группе – на 3,28 %, во
2-опытной – на 3,98 % и в 3-опытной – на 4,82 %.
Коэффициент переваримости сырого жира максимальным был в 1-опытной
группе (59,53 %), что – на 3,28 % больше, чем в контрольной группе. Однако
переваримость БЭВ у гусят-бройлеров контрольной группы больше по сравнению
с опытными – на 0,99 %, 0,03 % и 0,55 %.
Изучению баланса азота в организме птицы придают большое значение при
анализе научных исследований. Часть поступивших с кормом азотистых веществ
выделяется в помете и расходуется птицей на производство продукции (прирост) и
поддержание жизни. Результаты изучения баланса азота у подопытных гусят-
бройлеров представлены в таблице 3.
Таблица 3 – Баланс азота (г, на голову в сутки), (
x
S
X
±
)
Группа
Показатель
Контрольная 1-опытная 2-опытная 3-опытная
Принято с
кормом
10,41 10,30 10,58 10,45
Выделено с
пометом
8,15 7,77 8,11 7,98
Баланс
±
2,25 2,53 2,48 2,47
Использование
азота, от
принятого, %
21,23 24,06 22,96 23,17
Гусята всех групп потребили практически одинаковое количество азота.
Однако с пометом гусята-бройлеры опытных групп выделяли меньшее количество
азота по сравнению с контрольными – на 4,69 %, 0,60 % и 2,16 %. В теле гусят-
бройлеров опытных групп откладывалось больше азота, чем в контрольной группе.
При одинаковом потреблении азота корма, использование его было разным.
Гусята-бройлеры контрольной группы меньше использовали азот по сравнению с
опытными группами – на 2,89 %, 1,77 % и 1,98 %.
Наличие или отсутствие минеральных ионов – иногда в малых количествах,
а иногда в больших - нужно рассматривать как очень важный фактор
сбалансированного питания.
Ионы кальция необходимы для нормальной деятельности сердца, участвуют
в регуляции мышечной и нервной деятельности, повышают защитные функции
организма. Усвоение и обмен кальция тесно связаны с обеспеченностью птицы
фосфором, который содержится во всех тканях организма и является непременным
компонентом его внутренней среды. Из общего фосфора растений 60-80 % связано
с фитином и птицей практически не используется. А неорганический фосфор и
фосфор кормов животного происхождения используется птицей хорошо. В таблице
4 приведены данные по балансу кальция и фосфора.
Таблица 4 – Баланс кальция и фосфора (г, на голову в сутки), (
x
S
X
±
)
Группа
Показатель
Контрольная 1-опытная 2-опытная 3-опытная
Кальций
Принято с
кормом
4,18 4,14 4,22 3,95
Выделено с
пометом
1,84 1,73 1,72 1,73
Баланс ±
2,33
2,41
2,50
2,23
Использование,
от принятого, %
54,75 57,12 58,21 55,20
Фосфор
Принято с
кормом
3,79 3,83 3,70 3,56
Выделено с
пометом
2,42 2,33 2,21 2,20
Баланс ±
1,36
1,51
1,49
1,36
Использование,
от принятого, %
35,46 38.35 39,51 37,52
Количество принятого с кормом кальция не имело достоверной разницы,
однако из организма гусят-бройлеров контрольной группы его выделялось больше
по сравнению с 1-опытной – на 6,38 %, со 2-опытной – на 6,91 % и 3-опытной – на
6,38 %. Баланс кальция был положительный во всех группа, но больше
резервировано его организмом гусят-бройлеров 2-опытной группы – 2,04 г, или –
на 3,33 % по сравнению с контрольной группой. Использовали кальций от
принятого количества лучше гусята-бройлеры опытных групп – на 2,42 %, 3,53 % и
0,46 %.
По количеству принятого с кормом, выделенного с пометом и усвоенного
фосфора гусятами-бройлерами всех групп достоверной разницы не отмечено. Его
использование от принятого количества было больше в опытных группах – на 2,95
%, 4,14 % и 2,11 %.
Таким образом, приведенные исследования по изучению влияния различных
доз фитопрепарата «Тополин» вводимые в рацион показали, что фитопрепарат
«Тополин» положительно влиял на переваримость питательных веществ и
способствовал лучшему усвоению азота, кальция и фосфора.
Литература
1. Околелова Т.М., Кулаков А.В., Молоскин С.А., Грачев Д.М. Корма и
ферменты. – Сергиев Посад, 2001. – С. 11-12.
2. Околелова Т.М. и др. Новые биологически вещества в птицеводстве. –
М.: Агропромиздат, 1989. – С. 2-3.
3. Кочиш И.И., Петраш М.Г., Смирнов С.Б. Птицеводство. – М.: Колос,
2004. – С. 262-263.
Түйін
Рацион жеуге жарамды адамгершілігі компоненттерді оған кіруші
анықталады. Компоненттердің қолдануы үлкен дəрежелер азықтар тəуелді болады,
асқазан - ішек даңғыл жол функционал қабілеттіліктері. Фитопрепарата кіріспесі
«Тополин» рациондарға-бройлерлерді жоғарылатуға рұқсат етті қайта пісіруінің,
сонымен қатар азот меңгеру, кальцийды жəне фосфорды.
Summary
Nourishing dignity of the ration is defined welds falling component into it. Use
component stern in greater degree depends on functional ability of the gastrointestinal
tract. Introduction phytoplankton «Рoplar» in rations geese-broiler allowed to raise,
recook as well as assimilation of the nitrogen, calcium and phosphorus.
ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ
АНТИТЕЛ СПЕЦИФИЧНЫХ К
BACILLUS SUBTILIS
Сарина Н.И.
1
, Бакирова Г.А.
1
, Алмагамбетов К.Х.
2
1
РГП «Национальный центр биотехнологии Республики Казахстан»,
КН МОН РК, г. Астана
2
Евразийский национальный университет им. Л.Н. Гумилева, г. Астана
Основным достоинством моноклональных антител является возможность их
получения в неограниченных количествах с идентичными от партии к партии
физико-химическими характеристиками. Это позволяет создавать на их основе
стандартные диагностические реагенты.
Хотя сам процесс получения гибридом достаточно трудоемок и дорог, тем не
менее, после того как гибридома получена, крупномасштабное производство
моноклональных антител стоит довольно дешево и все затраты на получение
гибридом себя оправдывают. В качестве недостатка моноклональных антител часто
указывают на нестабильность гибридом и возможную потерю ими продукции
антител. Однако большинство гибридом достаточно стабильно, если их
реклонировать 1-2 раза в год.
Основным преимуществом использования гибридом является то, что в
процессе клонирования и отбора исследователь может выбрать гибридомы с
желательными для него свойствами в отношении специфичности взаимодействия,
констант аффинности, физико-химических свойств, влияющих на возможности их
использования в анализе.
Все моноклональные антитела имеют одинаковую специфичность,
одинаковы по аффинности, относятся к одному классу и подкласу. Поскольку
моноклональные антитела являются нормальным компонентом иммунного ответа
организма, то они могут распознавать общие эпитопы на разных антигенах или
полиморфные формы одного и того же эпитопа. Однако моноклональные антитела
могут распознавать только одну из полиморфных форм эпитопа и могут не
распозновать другие полиморфные формы молекулы антигена.
После получения очищенных и концентрированных препаратов антител
повторно в иммунохимических реакциях определяют их специфическое действие.
Проводят как качественные, так и количественные проверки [1,2,3].
Получение моноклональных антител не только полностью решило вопрос
идентификации микроорганизма, но и открыло возможность изучения различных
физиологических и биохимических процессов жизнедеятельности возбудителя
путем определения отдельных белков-ферментов и т.д.
Основным преимуществом моноклональных антител является их высокая
специфичность. Это связано с тем, что моноклональные антитела продуцируются
одним лимфоцитом, который распознает лишь одну антигенную детерминанту.
Поэтому моноклональные антитела способны различать очень сходные антигены.
Методы по получению моноклональных антител постоянно развиваются и
совершенствуются. Это позволило расширить границы их применения в
практических целях и сделать целый ряд открытий теоретического характера в
области молекулярной биологии и иммунохимии [4,5,6].
Целью настоящих исследований являлось изучение иммунохимической
характеристики моноклональных антител полученных к белковым антигенам
Bacillus subtilis.
Для достижения цели были поставлены следующие задачи:
1. Изучить активность и специфичность полученных моноклональных
антител к разным сапрофитным видам бацилл.
2. Изучение иммунохимических свойств моноклональных антител
специфичных к Bacillus subtilis.
Материалы и методы исследования
Для культивирования гибридных клеток использовали среду RPMI-1640
(Himedia, Индия) с добавлением 10% фетальной сыворотки плода коровы (Himedia,
Индия), 0,05 мг/л пирувата натрия (Sigma, США), 0,003 мл/л 2-меркаптоэтанола
(Германия).
В работе методом гибридомной технологии нами были получены штаммы
гибридом, продуцирующие моноклональные антитела (2G2A8, 3F8E6) к белковым
антигенам Bacillus subtilis 26 (хлеб) и Bacillus subtilis 8 (зерно пшеницы). Асцитные
жидкости получали культивированием клеток гибридом в брюшной полости
чистопородных мышей линии BALB/с, предварительно обработанных пристаном
(2,6,10,14-тетраметилпентадекан) (Sigma, США).
Корпускулярные антигены: Bacillus subtilis АТСС 6633, Bacillus firmus S-20,
Bacillus termononliguafaciens ТР 1/1 DG-9, Bacillus licheniformis 356, Bacillus species
13/7, Bacillus polymyxa 1459, Bacillus acidocoldarius БТ 90, Bacillus thuringiensis
subsp terebrionis; растворимые антигены: белковые антигены выделенные из
изолятов Bacillus subtilis 26, Bacillus subtilis 8, Bacillus subtilis 42, Bacillus subtilis 43,
из объектов внешней среды Акмолинской области сотрудниками ДГП
«Республиканская коллекция микроорганизмов» [10, 11].
Постановку иммуноферментного анализа осуществляли в непрямом
варианте по общепринятому методу. Иммуноблотинг проводили по методике P.K.
Towbin et al (1979) [7]. Константу связывания моноклональных антител определяли
по методу J. Beatty et al (1987) [8]. Класс и подкласс моноклональных антител
определяли с помощью двойной иммунодиффузии по методу O. Ouchterlony (1958)
[9].
Результаты исследований
На основании предварительных результатов, методом гибридомной
технологии получены штаммы гибридных культивируемых клеток - продуцентов
моноклональных антител к белковым антигенам Bacillus subtilis 26 (хлеб) и Bacillus
subtilis 8 (зерно пшеницы). Очищенные моноклональные антитела из асцитной
жидкости были тестированы в непрямом иммуноферментном анализе с
использованием антигенов бацилл и других гетерологичных микроорганизмов,
имеющих антигенное сродство.
Важной характеристикой моноклональных антител является их активность и
специфичность. Активность и специфичность МКА, синтезируемых гибридными
клетками 2G2A8 и 3F8E6 по отношению к различным антигенам были изучены в
иммуноферментном анализе (таблица 1).
Таблица 1 - Изучение активности и специфичности моноклональных антител
Титры моноклональных антител
в культуральной жидкости
в асцитной жидкости
Виды антигенов
2G2A8 3F8E6 2G2A8 3F8E6
Растворимые антигены:
Bас. subtilis 26
(хлеб)
1:128
РО 1:25600
РО
Bас. subtilis 8 (зерно
пшеницы)
РО 1:64
РО 1:12800
Bас. subtilis 42
(почва)
РО
РО
РО
РО
Bас. subtilis 43
(мука)
РО
РО
РО
РО
Корпускулярные антигены:
Bас. subtilis АТСС
6633
РО
РО
РО
РО
Bас. firmus S – 20
РО
РО
РО
РО
Bас.
termononliguafaciens
ТР 1/1 DG – 9
РО
РО
РО
РО
Bас. licheniformis
356
РО
РО
РО
РО
Bас. species 13/7
РО
РО
РО
РО
Bас. polymyxa 1459 РО
РО
РО
РО
Bас. acidocoldarius
БТ 90
РО
РО
РО
РО
Bас. thuringiensis
subsp terebrionis
РО
РО
РО
РО
Примечание: РО-реакция отрицательная
Как видно из таблицы 1, при анализе активности и специфичности
моноклональных антител с растворимыми и корпускулярными антигенами бацилл
антитела взаимодействовали с растворимыми белковыми антигенами Bacillus
subtilis 26 и Bacillus subtilis 8. Гибридные клетки 2G2A8 (1:25600) и 3F8E6
(1:12800) показали высокую антительную активность в асцитной жидкости по
отношению к конкретным белковым антигенам Bacillus subtilis. При анализе
специфичности
моноклональных
антител
установлено,
что
антитела
синтезируемые штаммами гибридом не находят родственные эпитопы в составе
корпускулярных и других белковых антигенов Bacillus subtilis, которые
доказывают высокую специфичность к конкретным антигенам Bacillus subtilis.
Таким образом, полученные результаты исследований свидетельствуют о
специфичности моноклональных антител к эпитопам, находящимся в составе
белковых антигенов Bacillus subtilis.
Одним из важных свойств моноклональных антител является аффинность,
которая характеризует уровень сродства антитела к испытуемому антигену, т.е.
степень совпадения (комплементарности) конфигураций активного центра
антитела и антигенной детерминанты. Аффинность может быть количественно
измерена с помощью определения константы связывания.
Для определения местоположения эпитопа белка клеточной стенки Bacillus
subtilis, к которым направлены моноклональные антитела, нами проведен
иммуноблотинг, включающий перенос с полиакриламидного геля фракций белка
на носитель, с последующей постановкой ИФА.
Определение классов и подклассов продуцируемых моноклональных
антител проводили в реакции двойной иммунодиффузии по O. Ouchterlony с
моноспецифическими антисыворотками к подклассам иммуноглобулинов мышей
IgM, IgA, IgG, IgG1, IgG2, IgGb (Sigma, США). Результаты изучения
иммунохимической характеристики приведены в таблице 2.
Таблица 2-Иммунохимическая характеристика моноклональных антител
Штаммы
гибридом
Класс
и
подкласс
монокло-
нальных
антител
Титры
антител в
культуре
клеток
Титры
антител после
очистки
сульфатом
аммония
Константа
связывания
моноклонал
ьных
антител
Молекул
ярная
масса
монокло
нальных
антител
2G2A8 Ig
G
1
1:128 1:25600 4,5х10
−8
М 66
кДа
3F8E6 Ig
G
1
1:64 1:12800 2х10
−8
М 66
кДа
Как видно из таблицы 2, показатели константы связывания моноклональных
антител составили у штаммов гибридом 3F8E6 2х10
−8
М и у штамма 2G2A8
4,5х10
−8
М, что свидетельствуют о высокой степени совпадения конфигураций
активного центра антитела и антигенной детерминанты. Иммунохимическое
проявление полос с помощью моноклональных антител 2G2A8 и 3F8E6 и
антимышинных антител, меченных ферментом пероксидазой хрена, показало
специфичность МКА к эпитопу, расположенному в составе белка, с молекулярной
массой 66 кДа. Постановка реакции диффузной преципитации показала, что все
типы моноклональных антител относятся к классу IgG, подклассу 1, о чем
свидетельствует четкая линия преципитации, образовавшаяся между лунками,
содержащими
образцы
моноклональных
антител
и
соответствующие
антисыворотки.
Очищенные сульфатом аммония моноклональные антитела анализировались
методом электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата
натрия. Электрофорез показал наличие двух белковых полос с молекулярными
массами 66 кДа и 24 кДа, что соответствует молекулярной массе тяжелой и легкой
цепи иммуноглобулинов и свидетельствует о высокой степени очистки асцитной
жидкости.
Таким образом, методом гибридомной техники нами получены штаммы
гибридных культивируемых клеток 2G2A8 и 3F8E6, стабильно продуцирующие
моноклональные антитела к белковым антигенам Bacillus subtilis с молекулярными
массами 66 кДа. Результаты изучения специфичности и иммунохимических
характеристик моноклональных антител свидетельствуют о том, что они по своим
основным свойствам соответствуют требованиям, предъявляемым к антителам,
используемым в разработке иммуноферментных методов.
|