Результаты исследования:
Цитограммы при различных формах рецидивирующего герпетического стоматита имели общие черты. Прежде всего , это наличие межуточного вещества (межтканевой жидкости), заполняющей герпетический пузырек, который образовался при везикулярной форме заболевания. Это жидкость образовывала малиновый фон или образовывал сгущения в виде тяжей или хлопьев. В большем или меньшем количестве обнаруживались свежие эритроциты. Всегда присутствовали бактерии: кокки, палочки, иногда нитчатые бактерии рода Leptotrix , грибы рода Candida.
Эпителиальный компонент был представлен клетками плоского эпителия различных слоев в зависимости от глубины поражения слизистой( фото-1,2,3). На клетках верхних слоев 5-ой и 4-ой степени дифференцировки , наблюдалась контаминация бактерий(фото-4,5). Необходимо отметить различия в цитограммах, связанные с методикой забора материала. Если материал получали методом отпечатка, то в препарате отмечалось больше поверхностных клеток, чем в соскобе. Возможно, этим объясняется высокий ИДК при некротической форме стоматита, когда мы изучали мазки - отпечатки.
Фото 1. Везикулярная форма воспаления. Клетки поверхностного слоя плоского эпителия. Межуточные вещества малинового цвета.
Фото – 2. 1-клетки плоского эпителия, 1- жазық эпителий жасушалары, воспалительные элементы и эритроциты.
3- фото Инфильтративно- язвенная форма воспаления.
Клетки глубокого слоя плоского эпителия. 2 – эритроциты. 3- нейтрофилы. 4 – лимфоциты.
4-фото. Контаменация микробов на клетках плоского эпителия.
1 – на клетках плоского эпителия колония микробов. 2 – нейтрофилы. 3 – лимфоциты.
5- фото. Колонизация бактерии (нитевидные бактерии рода Leptotrix). 2 – нейтрофилы. 3 – лимфоциты.
ЦПЭ, вызванный воздействием вируса, проявлялся увеличением ядер клеток, мелкоглыбчатым распадом ядра, вакуолизацией цитоплазмы, появлением клеток, с двумя ядрами и более ( фото 6,7, 8, 9)
6-фото. 1 – нейтрофилы. 2 – лимфоциты. 3 – вакуольизация цитоплазмы клетки.
7- фото. Некротическая форма воспаление. 1 – некротизация клеток повехностного слоя эпителия. (5- стадия дифференцировки). 2 – элементы воспалительного инфильтрата- нейрофилы3 – лимфоциты.
8-фото. 1 – многоядерная клетка. 2 – фиброциты. 3 – клетки мелкоглыбчатым распадом ядра.
9-фото. Некротичесая форма воспаления. 1 – некротизация клеток. 2 – пассивные нейтрофилы. 3 – нейтрофилы умеренной активности. 4 – структурноразрущаюшиеся нейтрофилы.
Воспалительный инфильтрат состоял из нейтрофильных лейкоцитов, лимфоцитов, моноцитов и макрофагов, редких эозинофилов. Нейтрофилоциты были различных форм: в состоянии выраженной деструкции; с признаками функциональной активности, проявляющейся увеличением размеров клеток (ядра и цитоплазмы), образованием лопоподий и вакуолей; инертные нейтрофилоциты были мелких размеров, округлой формы, с плотным ядром. У разных больных были разные проявления фагоцитарной функции нейтрофилов - от редких экземпляров, фагоцитирующих единичные бактериальные тела до нейтрофилов, цитоплазма которых переполнена бактериями. Лимфоидные элементы были преимущественно в виде лимфоцитов (больших и мелких), лимфобласты встречались гораздо реже. Довольно часто обнаруживались моноциты и скопления макрофагов. Встречались макрофаги, фагоцитирующие нейтрофилоциты (фото10).
10- фото.. 1- клетки плоского эпителия (5- стадии дифференцировки). 2- нейтрофилы. 3- колония макрофагов. 4- лимфоциты.
В результате углубленного анализа с подсчетом клеточных элементов определены четкие различия цитограмм при везикулярной, инфильтративно- язвенной и некротических формах герпетического стоматита (таблица 1)
Таблица 1
|
Везикулярная форма
|
Некротическая форма
|
Инфильтративно – язвенная
|
Клеточность мазка
|
Мало – или умеренноклеточный
|
Обильно клеточный
|
Обильно клеточный
|
Фон
|
Жидкостный, прозрачный слегка малиновый
|
Малиновый с волокнистыми и хлопьевидными сгущениями
|
Редкие тяжи фибрина
|
Эритроцит
|
Единичные или в умеренном количестве
|
Большом количестве
|
В умеренном количестве
|
Флора
|
Бактерии
|
Бактерии, грибки
|
Бактерии (кокки, палочки)
|
Нормальные клетки
|
81-90% ИДК – 474,75
|
39-60% ИДК – 373
|
65,9 – 66,4% ИДК – 304
|
Клетки ЦПЭ
|
10-19%
|
40-51%
|
34,1 – 33,6%
|
Соотношение эпителиоцитов и элементов воспаления
|
~1\10
|
~1\50
|
~1\30
|
Полибласты, фиброциты
|
0-1 (на 100 элементов воспаления)
|
4-8 (на 100 элементов воспаления)
|
1 – 2 (на 100 элементов воспаления)
|
Как видно из таблицы, при везикулярной форме мазок был мало – или умеренно клеточный. По краям отпечатка захватывались безъядерные чешуйки и нормальные поверхностные эпителиоциты. Жидкость, наполняющая герпетический пузырек, в масках создает довольно равномерно малиновый фон разной интенсивности. Середину отпечатка занимало межтканевая жидкость, в которой имелись малочисленные эритроциты, небольшое количество бактерий, эпителиальные клетки.
Нормальные клетки были преимущественно верхних слоев, 5и 4 степеней дифференцировки:
1 – 0
2 – 0
3 – 6,25%
4 – 29% ИДК = 3х6,25+4х29+5х48,5+6х16,25=474,75
5 – 48,5%
6 – 16,25%
ИДК=474,75 что было ненамного ниже нормы. Около 10% нормальных клеток были контаминированы бактериями. Бактерии также находились в виде скоплений (фото 2,3) и в небольшом количестве были фагоцитированы отдельными нейтрофилами. Вирус – трансформированные клетки составляли не более 10 – 19%, в среднем 16% от эпителиального компонента.
При некротической форме мазок отличался высокой клеточностью, основную массу составляли элементы воспаления (фото 4). Межтканевая жидкость лежала неравномерно, иногда хлопьями, образовывала волокнистые сгущения. Отмечалось большое количество эритроцитов (до 30 – 50 в поле зрения). Обсемененность бактериями была умеренной, около 20% нормальных клеток верхних слоев были адгезированы бактериями. У 1 больного обнаружены фрагменты мицелия грибов рода Candida.
Эпителиальный компонент отличался большим разнообразием. Нормальные клетки были как поверхностного и промежуточного, так и более глубоких слоев:
1 – 0%
2 – 7%
3 – 34.75%
4 – 42,25% ИДК= 2х7+3х34,75+4х42,25+5х14,75+6х2=373
6 – 2%
ИДК= 375 что значительно ниже нормы и этого же показателя при везикулярной форме стоматита, что подтверждает более глубокое поражения эпителия при некротической форме.
Процент клеток с проявлениями ЦПЭ был самым высоким в среднем, 51,25%. Имелись клетки типа фиброцитов. Их число было в несколько раз больше, чем при везикулярной и инфильтративно – язвенной форма стоматита.
При инфильтративно - язвенной форме мазки имели обильный клеточный состав. Жидкости почти не заметно, имелись редкие тяжи фибрина. Основную массу клеточных элементов составляли нейтрофилы, моноциты и макрофаги, а также лимфоциты. Бактерии обнаруживались в умеренном количестве. Эритроциты имелись во всех полях зрения по несколько экземпляров (3-7).
Эпителиальный компонент представлен клетками плоского эпителия всех слоев, включая базальные
1 – 9,5%
2 – 28,58%
3 – 25,54%
4 – 24,31% ИДК – 1х9,5+2х28,58+3х25,54+4х24,31+5х9,35+6х2,76=303,83
5 – 9,35%
6 – 2,76%
7 – 2,76%
ИДК = 304, это самый низкий показатель из трех форм стоматита. Число клеток с ЦПЭ составило 33,6% от всех эпителиоцитов.
Различия в цитограммах отмечались не только в количестве вирус –трансформированных клеток, но и в проявлении ЦПЭ (таблица 2):
Таблица 2.
|
Везикулярная форма
|
Некротическая форма
|
Инфильтративно- язвенная форма
|
Нормальные клетки
|
81 – 90% в среднем – 84%
|
39-60% в среднем-51,25%
|
65,9-66,4% в среднем-66%
|
Клетки увеличенные ядрами
|
3-6% в среднем-4,5%
|
4-10% в среднем-7,75%
|
7,8-13,11% в среднем-10,5%
|
Вакуолизация цитоплазмы
|
2-4% в среднем-2,25%
|
5-9% в среднем-6,75%
|
1,4-1,6% в среднем 1,5%
|
Мелкоглыбчатый распад ядро
|
2-9% в среднем-3,75%
|
5-16% в среднем-11,25%
|
0,82-6,4% в среднем-3,61%
|
Клетки неправильной формы
|
_
|
1-3% в среднем-2,25%
|
0-4,25% в среднем-2,12%
|
Некротизация клетки
|
2-5% в среднем-3,5%
|
9-15% в среднем-6,75%
|
4,9-6,3% в среднем-5,65%
|
2 ядерные клетки
|
0-2% в среднем-1%
|
5-10% в среднем-6,75%
|
5,7-6,5% в среднем-6,13%
|
Многоядерные клетки (более 2 –х ядер )
|
_
|
1-3% в среднем-2%
|
0,82-1,4% в среднем-1,11%
|
Как видно из таблицы 2 при везикулярной форме стоматита ЦПЭ проявлялся большой степени увеличением ядер (4,5%), мелкоглыбчатым распадом ядер (3,75%) вакуолизацией цитоплазмы (2,25%), некротизацией клеток (3,5%). Выявлялось небольшое количество двуядерных клеток (1%). Клетки с числом ядер более 2-х не обнаружены.
При некротической форме чаще выявлялись вышеперечисленные проявления ЦПЭ: ядро увеличены 7,75% клеток, мелкоглыбчатый распад ядер наблюдался 11,25%, вакуолизация цитоплазмы имела место у 6,75%, 2-ядерные клетки были видны в 7 раз чаше чем при везикулярной форме (6,75%). Несколько больше, чем при инфильтративно – язвенной форме стоматита было число клеток неправильной формы (2,25% ) и клеток с числом ядер более 2 – х (2%) (фото 6,8).
При инфильтративно язвенной форме стоматита проявления ЦПЭ имели 33,4% эпителиоцитов. При этом клетки с увеличенными ядрами составляли уже 10,5%, по 2 ядро имели 6,13% от числа всех клеток плоского эпителия. Проявлялись клетки неправильной формы (2,12%) и много ядерные клетки (1,11%).
Выявлялись различия и в характере воспалительного инфильтрата (таблица 3). Прежде всего, соотношение между эпителиальным и воспалительном компонентом в случае везикулярного стоматита было примерно 10 лейкацитов на 1 эпителиоцит, при некротическом и инфильтративно-язвенном 30-50 лейкоцитов на 1 эпителиоцит.
Таблица 3
|
Везикулярная форма
|
Инфильтративно-язвенная
|
Некротическая форма
|
Нейтрофильные лейкоциты
|
55,6%
|
62,53%
|
84,5%
|
Лимфоциты
|
17,13%
|
7,48%
|
10,25%
|
Моноциты, макрофаги
|
26,0%
|
28,8%
|
5,25%
|
эозинофилы
|
1,1%
|
0,18%
|
-
|
При везикулярной форме стоматита воспалительный инфильтрат содержал в среднем 55,6% нейтрофильных лейкоцитов, 17,13% лимфоцитов и 26,0% моноцитов и макрофагов, имелись редкие эозинофилы (1,1%). Нейтрофилы и лимфоциты имели признаки функционально активации. Они были крупных размеров с большим количеством цитоплазмы, в отдельных имелись вакуоли и выросты цитоплазмы в виде лобоподий.
При некротической форме основную массу препарата составляли нейтрофильные лейкоциты (84,5%). Нейтрофилы были в основном с деструктивными изменениями в состоянии распада или мелкие округлые инертные формы. Лейкоциты составляли 10,25% от инфильтрата, моноциты и макрофаги-5,25%.
При инфильтративно-язвенной форме процент нейтрофилов был несколько больше (62,53%). При этом отмечалось большое число активных фагоцитирующих лейкоцитов. Лимфоцитов было немного (7,48%), но было увеличено число моноцитов и макрофагов (28,8%). Этот показатель был самым высоким в трех группах.
Как видно из вышеописанного, при везикулярной форме стоматита был меньше процент нейтрофильных лейкоцитов за счет увеличения процента лимфоцитов и моноцитов. Характер инфильтрата говорит о большой напряженности иммунитета, результатом чего явилась более легкая форма герпетического стоматита.
Таким образом, цитограммы при везикулярной, некротической и инфильтративно-язвенной форма герпетического стоматита имеют свои особенности и отражают глубину поражения тканей СОПР. Проявления ЦПЭ под воздействиям вируса указывают на проявления действенных механизмов иммунитета.
При герпетическом стоматите обнаружена следующие проявления ЦПЭ:
Увеличение размера ядра
Мелкоглыбчатый распад ядер
Вакуолизация цитоплазмы
Некротизация клеток
Проявление клеток неправильной формы
Проявление 2 –х и многоядерных клеток
Количество клеток, подверженных цитопатическому воздействию вируса , было заметно больше при некротической форме герпетического стоматита, чем при везикулярном.
Признак, наиболее характерный для герпетической инфекции – проявление многоядерных клеток (с 2 – мя ядрами и более- фото-11) обнаруживался в 1-8% клеток. Гигантские клетки были край Гигантские клетки были крайне редкой находкой, размеры многоядерных клеток почти не превышали размеры поверхностных клеток.
11-фото. 1-многоядерная клетка 2- двух ядерная клетка. 3- одноядерная клетка; элементы воспаления, эритроциты.
Кроме того, нами проведено цитологическое исследование при везикулярной и некротической форма герпетического стоматита в динамике, на 3-й день после начало лечения. В результате было установлено, что несмотря на начатое лечение, цитопатическое действие вирусы продолжалось. Это проявилось увеличением числа вирус – трансформированных клеток(фото12). При везикулярной форме оно достигло 26%, при этом появились единичные многоядерные клетки. При некротической форме процент клеток с ЦПЭ достигал 62.
12-фото. Активные, увеличенные в размерах нейтрофилы, эозинофилы, моноциты.
Однако изменения в характере воспалительного инфильтрата говорили о мобилизации механизмов иммунитета: становилось больше лимфоцитов и нейтрофилов с признаками функциональной активности, больше фагоцитирующих нейтрофилов. Отмечалось увеличение количество эозинофилов.
Достарыңызбен бөлісу: |