Фармацевтическая

76
спектром поглощения в видимой области спектра при 445 нм и в ультрафиоле-
товой области спектра при длинах волн 347, 268 и 223 нм. При этих длинах 
волн субстанция рибофлавина имеет следующие молярные показатели погаше-
ния раствора субстанции рибофлавина в 0,05 моль/л раствора натрия гидрокси-
да: 12 300 л/моль
⋅
см, 10 800 л/моль
⋅
см, 31 400 л/моль
⋅
см, 30 100 л/моль
⋅
см соот-
ветственно. Молярная масса рибофлавина составляет 376,4 г/моль. 
Реактивы: 
1) субстанция рибофлавина с чистотой не менее 99%. Класс чистоты — 
не ниже х. ч. или ч. д. а.; 
2) раствор натрия гидроксида с концентрацией 0,05 моль/л. 
Оборудование: 
1) спектрофотометр любой марки; 
2) автоматические пипетки объёмом 10–100 и 200–1000 мкл; 
3) пробирки; 
4) кюветы спектрофотометрические; 
5) весы аналитические, в том числе электронные. 
Ход
 
работы
: 
1) приготовление раствора натрия гидроксида с концентрацией 
0,05 моль/л; 
2) приготовление исходного раствора рибофлавина с концентрацией 
0,004 г/мл в растворе натрия гидроксида с концентрацией 0,05 моль/л; 
3) приготовление серии растворов рибофлавина с различными концен-
трациями (табл. 7); 
Таблица
 7 
Параметры приготовления растворов субстанции рибофлавина 
с различными концентрациями 
№ 
пробы 
Концентрации 
растворов 
рибофлавина, 
г/мл 
Объём 
очищенной
воды, 
мл 
Объёмы 
внесённого 
раствора 
рибофлавина, 
мл 
Оптическая 
плотность 
растворов 
при длине волны
445 нм 
1 
0 
2 
0 
0 
2 
0,000016 
2 
0,4 
0,469 
3 
0,000020 
2 
0,5 
0,533 
4 
0,000024 
2 
0,6 
0,720 
5 
0,000028 
2 
0,7 
0,713 
6 
0,000032 
2 
0,8 
0,864 
4) регистрируют спектр поглощения рибофлавина с концентрацией 
0,0001 моль/л в видимом диапазоне в области 300–500 нм, определяя оптиче-
скую плотность через каждые 20 нм, лучше — в интервале 10 нм. Отображается 
график зависимости оптической плотности от длины волны (рис. 40). 
76

77
Рис. 40.
График зависимости оптической плотности растворов рибофлавина 
от длины волны 
Для расчёта удельного и молярного коэффициентов погашения (погло-
щения) растворов рибофлавина необходимо пересчитать концентрацию раство-
ров из г/мл в моль/л. Так как знаменатель в обеих формулах разный, то итого-
вую формулу надо умножить на 1000, что значит 1000 мл или 1 л для перево-
да мл в л: 
1000.
М. м.
a
C
V
=
×
×
(1.43) 
C
= (
a
× 1000)/(М. м. × 
V
) = (0,000016 г × 1000 мл)/(376,4 г/моль × 1 л) = 
= 0,0000425 моль/л. 
C
= (
a
× 1000)/(М. м. × 
V
) = (0,000020 г × 1000 мл)/(376,4 г/моль × 1 л) = 
= 0,0000531 моль/л. 

жүктеу/скачать 66,35 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: