Для обезвреживания токсинов применяют следующие методы:
Длительное выдерживание (3–5 нед.) токсина в 0,3–0,5 % растворе формалина при температуре 39–40ºС (метод Рамона).
Использование окислителей (перекись водорода, тиазиновые и фталеиновые красители) при облучении видимым светом.
Обработка протеолитическим ферментами (трипсином, папаином, проназой) при температуре 40–60ºС с последующей гель-фильтрацией на колонках с сефадексом для удаления фермента из препарата.
Анатоксины
Полученный анатоксин вводят в организм вместе с адъювантами. Белковый антиген адсорбируют на геле алюминия гидроксида или алюминия фосфата.
В качестве консервантов препараты содержат 0,01 % раствор мертиолата или 0,25 % раствора фенола.
Анатоксины, применяемые для вакцинации: дифтерийный анатоксин, адсорбированный; столбнячный анатоксин, адсорбированный; стафилококковый анатоксин адсорбированный и др.
Особенности получения бактериальных анатоксинов
Установлены закономерности между морфологией и проявлением токсигенной активности штамма Clostridium tetani: большее количество токсина образуют S-формы колоний и штаммы, утратившие способность образовывать споры.
После максимального накопления токсина
в питательной среде на 6–7 сут. культивирования производят
двойную фильтрацию культуральной жидкости и получают стерильный нативный раствор, который обезвреживают 0,4 % формалином при 38 ºС в течение 21–25 сут.
Принято считать, что реакция формальдегид – белок состоит из 2 стадий:
в реакции участвуют активные радикалы циклических аминокислот (тирозина, аргинина, гистидина и триптофана).
Особенности получения бактериальных анатоксинов
Процесс детоксикации бактерийных токсинов протекает неравномерно.
В течение первых 4 сут. отмечается падение токсичности на 80–90 %, хотя биологическая безвредность достигается только спустя 2–4 нед. детоксикации.
При детоксикации происходят 2 процесса: собственно детоксикация препарата и стабилизация структуры молекулы антигена с образованием жестких связей и появлением всего комплекса свойств анатоксинов.
Эти два процесса идут с разными скоростями, что зависит от свойств и количества присутствующих балластных белков.
