Определение общего микробного числа (ОМЧ) ОМЧ горизонтальных и вертикальных поверхностей, халатов, рук определяют путем мерного высева жидкости или питательной среды, которой производили смыв.
В пробирках с тампонами или в колбах, содержащих салфетки (после проведения смывов) общий объем жидкости доводят до конечного объема, добавляя стерильный изотонический раствор хлорида натрия, чтобы получилось исходное разведение 1:10. После интенсивного встряхивания готовят десятикратные разведения с последующим мерным высевом. В зависимости от предполагаемой степени загрязненности, посевы производят из нескольких разведений.
Заключение по общей микробиологической чистоте дают на основании подсчетов по формуле:
n x 10
M = ————,
S
где М – общее микробное число (КОЕ),
n – количество колоний в 1 мл исходного разведения смыва (КОЕ),
10 – количество мл смачивающей жидкости (мл),
S – площадь, с которой произведен смыв, измеряемая в см2.
При определении ОМЧ вспомогательных материалов, аптечной посуды, пробок и пр. смывную жидкость в количестве 1 мл засевают в 2 чашки Петри с мясо-пептонным агаром, предварительно расплавленным и остуженным до 400С, с последующей инкубацией в термостате 18-24 часа при Т 370С.
Количество микроорганизмов не должно превышать 150 КОЕ с 3-х флаконов (колб, цилиндров и т.д.); 5-ти пробок, 5-ти прокладок и т.д. Кроме общего микробного числа определяют бактерии группы кишечной палочки (БГКП), к которым относятся 4 представителя семейства энтеробактерий:
1.Escherichia coli
2.Klebsiella spp.
3.Enterobacter spp.
4.Citrobacter spp.
При предполагаемой малой степени фекального загрязнения предварительно производят посев смыва на среду обогащения (среду Кеслера, глюкозо-пептонную среду).
При обнаружении БГКП контактным методом используют среду Эндо. Идентификация выделенных культур БГКП ведется по биохимической активности выделенных микроорганизмов.
Также проводят исследование смывов на наличие золотистого стафилококка, сальмонелл, протея, синегнойной палочки.