3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Биотехнологические способы размножения безвирусного картофеля
Получены результаты начальных исследований по разработке и внедрению в производство системы получения качественного семенного материала картофеля методами биотехнологии. Для массового размножения оздоровленного картофеля в культуре invitroнами были апробированы несколько вариантов компонентного состава питательной среды Мурасиге Скуга (МС) на растениях генотипа картофеля "Тохтар" (таблица 3). Изучено влияние сочетания различных фитогормонов и витаминов на формообразовательные процессы пробирочных растений картофеля при постоянных макро- и микроэлементах МС. Использовали следующие варианты среды МС (мг/л):
1) МС с добавлением пиридоксина (0,5), аскорбиновой кислоты (1,0), фолиевой кислоты (0,05), никотиновой кислоты (0,5), гиббере5ловой кислоты (2,0), ИМК (0,5), кинетина (1,0), 6-БАП (0,5), мезоинозита (100);
2) МС + те же компоненты, но без 6-БАП и с добавлением зеатина (0,2);
3) МС + те же компоненты, но без 6-БАП, зеатина и мезоинозита, с добавлением ИУК (0,5);
4) МС+ те же компоненты, но без фолиевой, никотиновой кислот, ИМК, 6-БАП, и зеатина, с добавлением мезоинозита, феруловой кислоты (0,02) и аденина (1.);
5) МС как в варианте 4, но без аденина, с добавлением мезоинозита;
6) МС как в варианте 4, но без мезоинозита, кинетина, ИМК, ИУК, с добавлением 2,4-Д (0,01);
7) МС как в варианте 4, но без мезоинозита, кинетина и ИМК, с добавлением зеатина (0,3), 2,4-Д (0,01) ), ИУК (0,3), 6-БАП (1,0).
При культивировании показано, что по интенсивности роста и выходу нормальных посадочных растений от общего количества проклонированных черенков предпочтительней оказались варианты 2 и 5, содержащих в своем составе кинетин и зеатин. Для клонального размножения растений генотипа "Тохтар" использовалась питательная среда МС варианты 2, 4 и 5 (таблица 3).
Выявлено, что для культивирования апикальной меристемы отобранных растений оптимальной является питательная среда МС с добавлением аденина 0,5 мг/л и фитогормонов: кинетина в концентрации 0,1% и ИУК в концентрации 0,05% для инициации роста безвирусных побегов. Показано, что наиболее оптимальной для роста побегов всех генотипов картофеля оказалась питательная среда МС с содержанием аденина, ИУК и кинетина (0,5мг/л, 0,05% и 0,1%, соответственно), где отмечен выход побегов 95-100%. При использовании другой питательной среды- Гамборга В5 отмечено образование каллусных культур, но не отмечено массового образования побегов (45-55%) (рисунки 3. 4).
Таблица 3 - Влияние различных вариантов питательной среды Мурасиге-Скуга наформирование пробирочных растений картофеля
Показатели
|
Варианты компонентного состава питательной среды МС
|
|
1
|
2
|
3
|
4
|
5
|
6
|
7
|
Среднее кол-во междоузлий, шт.
|
3
|
4
|
3
|
5
|
4
|
5
|
4
|
Средняя величина междоузлий, мм
|
13
|
13
|
13
|
11
|
12
|
10
|
10
|
Средний размер листа, мм
|
10
|
11
|
10
|
9
|
9
|
10
|
8
|
Корневая система: 1.мощная; 2.средняя;
3.отсутствует
|
средн.
|
средн.
|
мощн.
|
мощн.
|
мощн.
|
отсутству-ет
|
отсутствует
|
Общий выход растений, %
|
70
|
90
|
60
|
80
|
90
|
0
|
0
|
питательная среда МС; 2- питательная средаВ5.
Рисунок4. Влияние питательной среды на каллусо- и побегообразование из апикальной меристемы различных генотипов картофеля
Рисунок 4–пробирочные растения картофеля, полученные из апикальной меристемы
Таким образом, было установлено, что для получения пробирочных растений картофеля различных генотипов оптимальным является использование питательной среды МС с добавлением фитогормонов ИУК в сочетании с кинетином.Проростки, сформировавшиеся в пробирках со средами, можно рассматривать как небольшие укорененные растения, которые необходимо адаптировать к обычным условиям выращивания. Такие растения лучше пересаживать в грунт, когда полностью сформируются 5–6 листьев и достаточно разрастутся корни.
Достарыңызбен бөлісу: |