Жаныбекович Оптимизация условий трансформации картофеля Магистерский проект на соискание степени магистра технических наук по



бет22/27
Дата28.11.2023
өлшемі7,32 Mb.
#130646
1   ...   19   20   21   22   23   24   25   26   27
Байланысты:
Каримов Нурлыбек антиплагиат


Разделяющий, 12%

Концентрирующий, 4%

акриламид/бис-
аккриламид (30%Т,
2,67 % С stock)

4 мл



0,67 мл

деионизованная
вода

3,35 мл

3,05 мл



1,5М Трис HCl pH 8,8

2,5 мл

-

0,5М Трис HCl pH 6,8

-

1,25

10% SDS

100 мкл

50 мкл

10% ПСА.

100 мкл

50 мкл

TEMEД

10 мкл

10 мкл

Электрофорез проводили в вертикальном приборе при напряжении 200 В, постоянной силе тока 50 мА. Перед нанесением образцы белков нагревали 2 – 3 мин в кипящей водяной бане и быстро центрифугировали при 14000 об./мин в течение 5 мин.


Для приготовления электрофорезного геля готовили стоковые растворы.
2.8. Метод трансформации растений «биолистик»
Наиболее активно применяемым методом прямого переноса генов является способ генетической трансформации растений с использованием установки «short gun» (дробовик), называемый био(бал)листической трансформацией. Он нашёл самое широкое применение именно для трансформации злаковых. Суть метода заключается в том, что на микрочастицы-носители из химически инертного металла (золото, вольфрам, платина или лёд), размером 0,6-1,2 мкм, осаждается ДНК, а затем они с помощью порохового заряда, сжатого гелия или электрического поля разгоняются до высоких скоростей (1000 м/сек) и поток частиц кратковременно направляют на поверхность клеток. Некоторые из них проникают внутрь клеток и попадают в ядро, где могут включиться в хромосомы растения.




Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   19   20   21   22   23   24   25   26   27




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет