Курс лекций для студентов специальности -48 02 01 «Биотехнология» Минск 2014 034)


Условия производственного культивирования ризобактерий



Pdf көрінісі
бет45/63
Дата17.06.2022
өлшемі1,87 Mb.
#36984
түріКурс лекций
1   ...   41   42   43   44   45   46   47   48   ...   63
Условия производственного культивирования ризобактерий 
Бактерии Температура 
процесса, °С 
Уровень аэрации, 
м
3
/(м
3
· мин) 
Продолжительность 
ферментации, ч 
Титр КЖ, 
млрд/см
3
БКБ 28–30 0,8–1,2 
40–48 
8–9 
МКБ 28–30 0,5–1,0 
60–72 
3–4 
Культуральную жидкость при хранении захолаживают до темпе-
ратуры 10–15°С. В производстве ризоторфина в качестве наполнителя 
используют кислый или слабокислый торф (рН 3,0–6,0). Предвари-
тельно торф подсушивают до влажности 25–30%, добавляют мел до 
рН 6,8–7,0, размалывают до размера частиц не более 0,1 мм и расфа-
совывают в полиэтиленовые пакеты по 150–160 г с заполнением па-
кета на 40–50% (для газообмена). Толщина пленки пакета не более 
100 мкм (обеспечивает газообмен). Заполненные пакеты стерилизуют 
γ-излучением радиоактивного кобальта (термическая стерилизация 


118 
непригодна). В каждый пакет через полую иглу диаметром 5–8 мм 
вводят 50–60 см
3
культуральной жидкости. Инокуляцию проводят 
в стерильном боксе. Место прокола заклеивают липкой лентой. Со-
держимое пакетов усредняют во вращающемся барабане. Влажность 
препарата в пакете – 55–60%. Титр клеток ризобактерий 0,5–
1,5 млрд/г. В препарате бактерии продолжают расти в течение 4–5 
недель, после чего численность жизнеспособных клеток снижается, 
если не выдерживать продукт при 4°С и ниже. Для поддержания вы-
сокого титра жизнеспособных клеток содержимое пакета обогащают 
легкоусваиваемым субстратом: вводят 3–5% мелассы в виде стериль-
ного 80%-ного раствора для БКБ или 2,5% глюкозы в виде стерильно-
го 40%-ного раствора для МКБ. 
Препараты БКБ хранят при температуре 5–10°С, препараты 
МКБ – при 12–15°С. Продолжительность хранения в указанных усло-
виях – до 6 месяцев. 
Ризоторфин вносят в почву во время сева в смеси с семенами (по-
сле тщательного перемешивания). Доза препарата – 200 г на 1 га (со-
держимое пакета – одна га-порция). При прорастании семян значи-
тельная часть клеток ризобактерий гибнет. Противостоять этому мо-
жет только высокий титр клеток в препарате.
Производство ризоторфина сезонное, число рабочих дней в го-
ду – 180. 
Разработана технология получения препарата «сухой нитрагин» 
из культуральной жидкости, содержащей ризобактерии. Для этого 
биомассу бактерий отделяют в бактофугах с получением пастообраз-
ного концентрата, в который вводят криопротектор (20% мелассы 
и 1% тиомочевины) и обезвоживают в сублимационной сушилке при 
30°С под разрежением из замороженного состояния до остаточной 
влажности 2–5%. Высушенную биомассу размалывают в шаровых 
мельницах и смешивают с наполнителем (торф, бентонит) с получе-
нием сухого препарата, содержащего 9–10 млрд клеток клубеньковых 
бактерий в 1 г. 
Азотобактерин – препарат на основе клеток аэробной бесспоро-
вой свободноживущей почвенной бактерии Azotobacter chroococcum
фиксирующей атмосферный азот. 
Молодые клетки имеют вид коротких палочек с закругленными 
концами. При старении клетки покрываются слизью, которая перехо-
дит в защитную капсулу. Бактерии чувствительны к содержанию 
в среде фосфора. Недостаток его резко замедляет развитие бактерий 
и снижает азотфиксацию. Стимулируют азотфиксирующую актив-
ность бактерий соединения молибдена. 


119 
Технология производства препаратов азотобактерина аналогична 
технологии получения ризоторфина и сухого нитрагина. При исполь-
зовании в качестве наполнителя торфа его обогащают суперфосфа-
том (0,1–0,2%). 
Эффект действия азотобактерина на растения связан не только 
с процессом азотфиксации и улучшения азотного питания растений, но 
и с обогащением почвы биологически активными соединениями, син-
тезируемыми бактериями (витамины группы B, аминокислоты). Одна-
ко эти бактерии активно развиваются только в плодородных почвах. 
Микробиологическая промышленность производит также бакте-
риальный препарат фосфоробактерин на основе спор Bacillus 
megaterium var. phosphaticum. В почве эти бактерии трансформируют 
сложные фосфорорганические соединения (нуклеиновые кислоты, 
нуклеопротеины и др.), а также трудноусваиваемые минеральные 
фосфаты в доступную для растений форму. Фосфоробактерин не мо-
жет заменить фосфорные удобрения и не действует при их отсут-
ствии. Препарат стимулирует рост растений и за счет обогащения 
почвы биологически активными веществами. 


120 


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   41   42   43   44   45   46   47   48   ...   63




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет