Лабораторная работа № 13 Пигменты фотосинтеза растений. Вопросы для коллективного обсуждения: Структура молекул хлорофиллов и каротиноидов
Спектры поглощения хлорофиллов и каротиноидов
Растворимость различных пигментов фотосинтеза в воде и органических растворителях
Опыт 1. Получение вытяжки пигментов и кристаллов хлорофилла. Листья исследуемых растений измельчите ножницами, затем разотрите в фарфоровой ступке с небольшим количеством битого стекла и несколькими каплями этилового спирта. Полученную массу разбавьте небольшим количеством спирта и перенесите на стеклянный фильтр. Фильтруйте раствор с помощью колбы Бунзена, соединенной с насосом, в пробирку небольшого размера. Полученную вытяжку используйте для последующих опытов.
На предметное стекло нанесите каплю вытяжки, подсушите и рассмотрите под микроскопом образовавшиеся кристаллы хлорофилла.
Опыт 2. Флуоресценция хлорофилла Налейте в пробирку 3-4 мл спиртовой вытяжки хлорофилла и рассмотрите раствор в отраженном свете лампы накаливания на фоне черной бумаги. Раствор становится кроваво-красным благодаря флуоресценции хлорофилла
Опыт 3. Разделение пигментов по Краусу В пробирку налейте 2-3 мл спиртовой вытяжки, добавьте несколько капель воды и 2 мл бензина, тшательно встряхните, закройте пробкой и дайте отстояться. Образуется три слоя жидкости различной окраски. Нижний (бензиновый) содержит длорофиллы и каротины, водный слой (средний) не содержит пигментов, верхний слой. Сформулируйте вывод о причинах различной растворимости пигментов.
Опыт 4. Омыление хлорофиллов. В пробирку налейте 2 мл спиртовой вытяжки пигментов, добавьте 4-5 капель 20% р-ра щелочи, взболтайте. Прилейте равный объем бензина, встряхните. Окрашивания бензинового слоя в зеленый цвет не происходит, поскольку образовавшиеся соли хлорофиллов не растворяются в бензине.
Опыт 5. Фотосенсибилизирующие свойства хлорофилла. В две пробирки налейте по 1-2 мл спиртовой вытяжки пигментов . В одну из них добавьте немного аскорбиновой кислоты и несколько капель раствора метилового красного. Пробирки поместите вблизи источника света. Через некоторое время наблюдается изменение окраски раствора. Сформулируйте вывод о причинах исследуемого явления.