Методы микроскопирования гистологических препаратов Основными методами изучения биологических микрообъектов являются
световая и электронная микроскопия, которые широко используются в экс
периментальной и клинической практике.
Микроскопирование — основной метод изучения микрообъектов, ис
пользуемый в биологии более 300 лет. С момента создания и применения
первых микроскопов они постоянно совершенствовались. Современные
микроскопы представляют собой разнообразные сложные оптические сис
темы, обладающие высокой разрешающей способностью. Размер самой ма
ленькой структуры, которую можно видеть в микроскопе, определяется
наименьшим разрешаемым расстоянием (d0), которое в основном зависит от
длины волны света
(X) и длины волн электромагнитных колебаний потока
электронов и др. Эта зависимость приближенно определяется формулой
do =
х/тк- Таким образом, чем меньше длина волны, тем меньше разрешае
мое расстояние и тем меньшие по размерам микроструктуры можно видеть
в препарате. Для изучения гистологических препаратов применяют разнооб
разные виды световых микроскопов и электронные микроскопы.
Световая микроскопия. Для изучения гистологических микрообъектов
применяют обычные световые микроскопы и их разновидности, в которых
используются источники света с различными длинами волн. В обычных
световых микроскопах источником освещения служит естественный или ис
кусственный свет (рис. 1, А). Минимальная длина волны видимой части
спектра равна примерно 0,4 мкм. Следовательно, для обычного светового
микроскопа наименьшее, разрешаемое расстояние равно приблизительно
0,2 мкм (d0 = У2 0,4 мкм = 0,2 мкм), а общее увеличение (произведение уве
личения объектива на увеличение окуляра) может быть 1500—2500.
Таким образом, в световом микроскопе можно видеть не только отдель
ные клетки размером от 4 до 150 мкм, но и их внутриклеточные структуры —
органеллы, включения. Для усиления контрастности микрообъектов приме
няют их окрашивание.
Ультрафиолетовая микроскопия. Это разновидность световой микроско
пии. В ультрафиолетовом микроскопе используют более короткие ультра-