Литература для студентов Учебная литература для студентов медицинских вузов и медицинских

Рис. 
1. Микроскопы для биологических иссле­
дований.
А — стандартный световой биологический микро­
скоп серии "Биолам": 1 — основание; 2 — тубусо-
держатель; 3 — наклонный тубус; 4 — окуляр; 5 —
револьвер; 6 — объективы; 7 — столик; 8 — конден­
сор с ирисовой диафрагмой; 9 — винт конденсора;
10 — зеркало; 11 — микрометрический винт; 12 —
макрометрический винт.
Б — трансмиссионный электронный микроскоп с
автоматизированной системой обработки изображе­
ний: 1 — колонка микроскопа (с электронно-опти-
ческой системой и камерой 
дня 
образцов); 2 —
пульт управления; 3 — камера с люминесцентным
экраном; 4 — блок анализа изображений; 5 — дат­
чик видеосигнала.
фиолетовые лучи с длиной волны около 0,2 мкм. Разрешаемое расстояние 
здесь в 2 раза меньше, чем в обычных световых микроскопах, и составляет 
приблизительно 0,1 мкм (do = 
1/ 2 0,2
мкм = 0,1 мкм). Полученное в ультра­
12

фиолетовых лучах невидимое глазом изображение преобразуется в видимое 
с помощью регистрации на фотопластинке или путем применения специ­
альных устройств (люминесцентный экран, электронно-оптический преоб­
разователь).
Флюоресцентная (люминесцентная) микроскопия.
Явления флюоресценции 
заключаются в том, что атомы и молекулы ряда веществ, поглощая корот­
коволновые лучи, переходят в возбужденное состояние. Обратный переход 
из возбужденного состояния в нормальное происходит с испусканием света, 
но с большей длиной волны. В флюоресцентном микроскопе в качестве ис­
точников света для возбуждения флюоресценции применяют ртутные или 
ксеноновые лампы сверхвысокого давления, обладающие высокой яркостью 
в области спектра 0,25—0,4 мкм (ближние ультрафиолетовые лучи) и 0,4— 
0,5 мкм (сине-фиолетовые лучи). Длина световой волны флюоресценции 
всегда больше длины волны возбуждающего света, поэтому их разделяют с 
помощью светофильтров и изучают изображение объекта только в свете 
флюоресценции. Различают собственную, или первичную, и наведенную, 
или вторичную, флюоресценцию. Любая клетка живого организма обладает 
собственной флюоресценцией, однако она часто бывает чрезвычайно сла­
бой.
П е р в и ч н о й ф л ю о р е с ц е н ц и е й обладают серотонин, катехолами­
ны (адреналин, норадреналин), содержащиеся в нервных, тучных и других 
клетках, после фиксации тканей в парах формальдегида при 60—80 °С (ме­
тод Фалька).
В т о р и ч н а я ф л ю о р е с ц е н ц и я возникает при обработке препара­
тов специальными красителями — флюорохромами.
Существуют различные флюорохромы, которые специфически связыва­
ются с определенными макромолекулами (акридин оранжевый, родамин, 
флюоресцеин и др.). Например, при обработке препаратов чаще всего упот­
ребляется флюорохром акридиновый оранжевый. В этом случае ДНК и ее 
соединения в клетках имеют ярко-зеленое, а РНК и ее производные — яр­
ко-красное свечение. Таким образом, спектральный состав излучения несет 
информацию о внутреннем строении объекта и его химическом составе. Ва­
риант метода флюоресцентной микроскопии, при котором и возбуждение, и 
излучение флюоресценции происходят в ультрафиолетовой области спектра, 
получил название метода 
ультрафиолетовой флюоресцентной микроскопии.
Фазово-контрастная микроскопия.
Этот метод служит для получения кон­
трастных изображений прозрачных и бесцветных живых объектов, невиди­
мых при обычных методах микроскопирования. Как уже указывалось, в 
обычном световом микроскопе необходимая контрастность структур дости­
гается с помощью окрашивания. Метод фазового контраста обеспечивает 
контрастность изучаемых неокрашенных структур за счет специальной 
кольцевой диафрагмы, помещаемой в конденсоре, и так называемой фазо­
вой пластинки, находящейся в объективе. Такая конструкция оптики мик­
роскопа дает возможность преобразовать не воспринимаемые глазом фазо­
вые изменения прошедшего через неокрашенный препарат света в измене­
ние его амплитуды, т. е. яркости получаемого изображения. Повышение 
контраста позволяет видеть все структуры, различающиеся по показателю 
преломления. Разновидностью метода фазового контраста является метод 

жүктеу/скачать 31,79 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: