Методические указания по написанию доклада Методические указания по текущей и промежуточной аттестации
Лабораторная работа Определение содержания β-липопротеинов (липопротеинов низкой плотности) в плазме крови
жүктеу/скачать 177,5 Kb.
|
1 RP 103113 MU 3
- Бұл бет үшін навигация:
- Указания к оформлению лабораторной работы
- 6.9 Лабораторная работа. Определение патологических компонентов в моче
| 6.8 Лабораторная работа Определение содержания β-липопротеинов (липопротеинов низкой плотности) в плазме крови
Исследуемый материал и реактивы 1. Кровь. 2. Вата. 3. Спирт. 4. Скарификатор.5. Раствор хлорида кальция (0,025М). 6. Раствор гепарина. Ход работы В пробирку вносят 2 мл 0,025М раствора хлорида кальция и 0,2 мл сыворотки крови, перемешивают и определяют экстинкцию (Е1) на фотоэлектроколориметре против раствора хлорида кальция в кюветах толщиной слоя 5мм при красном светофильтре (630 нм). Затем в кювету добавляют 0,1 мл раствора гепарина, перемешивают и точно через 4 мин снова определяют оптическую плотность раствора (Е2) в тех же условиях. Разница Е2- Е1 приходится на экстинкцию, обусловленную β-липопротеинами. Вычисляют разность оптической плотности и умножают ее на 10 – эмпирический коэффициент, предложенный Ледвиной, т. к. построение калибровочной кривой сопряжено с рядом трудностей. В норме содержание β-липопротеинов составляет 3–4,5 г/л. Содержание β-липопротеинов колеблется в зависимости от возраста и пола. Указания к оформлению лабораторной работы В тетради для лабораторных работ запишите ход работы, полученные результаты: Е1= Е2= х(г/л) = (Е2 – Е1)*10, x (г/л) = Сделайте выводы о возможных причинах отклонения полученных результатов от нормальных величин. 6.9 Лабораторная работа. Определение патологических компонентов в моче Опыт № 1 Определение белка Метод основан на образовании тонкого кольца осадка белка при наслоении мочи на реактив Ларионовой или 50% азотную кислоту. Экспериментально установлено, что растворы, содержащие 0,033 г/л, дают мутное белое колечко между второй и третьей минутой после наслаивания. Ход работы: В 5 пробирок вносят по 2 мл дистиллированной воды. В первую приливают 2 мл мочи, перемешивают и переносят 2 мл полученной смеси во вторую пробирку и т.д. Из пятой пробирки берут 2 мл смеси и отбрасывают, таким образом, получают пробы мочи с разведением в 2, 4, 8, 16 и 32 раза. В другие 5 пробирок наливают по 1 мл реактива Ларионовой. Затем осторожно, по стенке наслаивают такое же количество проб мочи с разведениями. Отмечают, в какой пробирке между 2-ой и 3-ей минутами появилось белое кольцо. Чтобы вычислить содержание белка в исследуемой моче, необходимо 0,033 г/л умножить на степень разведения мочи в пробирке с кольцом. Результат анализа: Опыт № 2 Обнаружение сахара в моче Для обнаружения сахара в моче пользуются пробами Троммера или Фелинга. Ход работы: К 5-6 каплям реактива Фелинга добавляют 5-6 капель исследуемой мочи, жидкость перемешивают и нагревают до начала кипения (не кипятить!). В присутствии глюкозы выпадает желтый осадок гидрата закиси меди или красный осадок закиси меди. (Возможно изменение цвета без осадка). Опыт № 3 Обнаружение кетоновых тел в моче Ход работы: Проба Легаля: К 10 каплям мочи добавляют 1-2 капли 5 % раствора нитропруссида натрия и 3-4 капли 10 % раствора NaOH. Появляется оранжево-красное окрашивание. Добавляют 5-6 капель концентрированной уксусной кислоты; в присутствии ацетоновых тел возникает вишнево-оранжевое окрашивание. Опыт № 4 Обнаружение кровяных пигментов Ход работы: В пробирку наливают 10 капель мочи, кипятят и охлаждают. Добавляют равный объем раствора бензидина и несколько капель 3 % перекиси водорода. При наличии кровяных пигментов моча окрашивается в синий или зеленый цвет. Опыт № 5 Обнаружение желчных пигментов Ход работы: В пробирку наливают 3-5 мл мочи и осторожно наслаивают 0,1 % спиртовой раствор йода. При наличии билирубина на границе между объемами жидкостей образуется зеленое кольцо. При наличии в моче крови проба также положительна. Полученные результаты работы записать в тетрадь и сделать вывод. Список использованных источников 1 Биохимия [Электронный ресурс] : электронное гиперссылочное учебное пособие / А. В. Дудко, А. Д. Стрекаловская, Е. С. Хайруллина; М-во образования и науки Рос. Федерации, Федер. гос. бюджет. образоват. учреждение высш. проф. образования "Оренбург. гос. ун-т". - Электрон. текстовые дан. (1 файл: 245 Mb). - Оренбург : ОГУ, 2015. -Архиватор 7-Zip 2 Теоретические основы биохимии [Электронный ресурс] : учеб. пособие / Е. С. Барышева, О. В. Баранова, Т. В. Гамбург; М-во образования и науки Рос. Федерации, Гос. образоват. учреждение высш. проф. образования "Оренбург. гос. ун-т". - Электрон. текстовые дан. (1 файл: Kb). - Оренбург : ГОУ ОГУ, 2011. -Adobe Acrobat Reader 5.0. Издание на др. носителе [Текст] . - ■ гос. регистрации 0321102524. http://artlib.osu.ru/web/books/metod_all/11_20110615.pdf 3 Тихонов, Г.П. Основы биохимии : учебное пособие / Г.П. Тихонов, Т.А. Юдина ; Министерство транспорта Российской Федерации, Московская государственная академия водного транспорта. - Москва : Альтаир : МГАВТ, 2014. - 184 с. : табл., ил. ; То же [Электронный ресурс]. - URL: http://biblioclub.ru/index.php?page=book&id=430055 4 Практические основы биохимии [Электронный ресурс] : учеб. пособие / Е. С. Барышева, О. В. Баранова, Т. В. Гамбург; М-во образования и науки Рос. Федерации, Федер. гос. бюджет. образоват. учреждение высш. проф. образования "Оренбург. гос. ун-т". - Электрон. текстовые дан. (1 файл: Kb). - Оренбург : ОГУ, 2011. -Adobe Acrobat Reader 5. Издание на др. носителе [Текст] . - № гос. регистрации 0321103142. http://artlib.osu.ru/web/books/metod_all/2868_20111011.pdf жүктеу/скачать 177,5 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|