Рис. 3. Микроскоп люминесцентный исследовательский серии 'Люмам ИЗ'
Для изучения микроорганизмов в
люминесцентном микроскопе их
предварительно окрашивают (флюорохромируют) сильно разведенными
растворами специальных люминесцирующих красителей (флюорохромов),
которые избирательно связываются с определенными структурами клетки.
Флюорохромы отличаются от обычных красителей тем, что применяются в
очень малых концентрациях (До нескольких мкг/мл); кроме того, ими могут
быть окрашены не только фиксированные, но и живые клетки.
Люминесцентная микроскопия также используется для регистрации
результатов реакции иммунофлюоресценции (РИФ) (см. главу 12).
Электронная микроскопия
Различные
способы световой микроскопии позволяют изучать сравнительно
крупные микроорганизмы (бактерии, простейшие), но не дают возможности
наблюдать объекты, величина которых меньше чем 0,2 мкм, так как
разрешающая способность микроскопа зависит от длины волны видимого
света. Поэтому в
световом микроскопе не может быть изучено строение
вирусов.
Принципиально новые возможности для изучения тонкого строения
бактерий и вирусов появились после изобретения электронного микроскопа.
В электронном микроскопе вместо световых волн для построения
изображения используют поток электронов в глубоком вакууме.
В
качестве "линз", фокусирующих электроны, служит электромагнитное
поле, создаваемое электромагнитными катушками. Изображение в
электронном микроскопе наблюдают на флюоресцирующем экране и
фотографируют. Объекты при электронной микроскопии находятся также в
глубоком вакууме, поэтому подвергаются фиксации и специальной обработке.
Кроме того, они должны быть очень тонкими, так как поток электронов сильно
поглощается. В связи с этим в качестве объектов используют ультратонкие
срезы толщиной 20-50 нм, что значительно меньше толщины вирусных частиц.
Разрешающая
способность современных электронных микроскопов равна 0,15
нм, что позволяет получить полезное увеличение в миллионы раз.
Электронный микроскоп по своим размерам и сложности устройства очень
отличается от светового. Колонна микроскопа, в которой находится объект и
разгоняются электроны, превышает рост человека, а для размещения
микроскопа нужна отдельная комната.
Контрольные вопросы
1. Из каких основных частей состоит микроскоп?
2. Как правильно настроить свет в микроскопе?
3
. В чем принцип фазово-контрастной микроскопии?
4. На чем основана темнопольная микроскопия и когда ее используют?
5. На чем основана люминесцентная микроскопия?
6. Что такое электронный микроскоп и какова его разрешающая
способность (увеличение)?