Ход исследования
Контрольные вопросы
1. На каких питательных средах выращивают микобактерии туберкулеза и
какова длительность их роста?
2. Чем и для чего обрабатывают мокроту до посева ее на питательные среды?
3. Опишите рост туберкулезной палочки на плотной и жидкой питательных
средах.
4. Какое животное является наиболее чувствительным к человеческому типу
туберкулезной палочки?
Питательные среды
Среда Левенштейна - Йенсена: солевой раствор; однозамещенный фосфат
калия - 2,4 г; магния сульфат - 0,24 г; магния цитрат 10,6 г; аспарагин - 3,6 г;
глицерин - 12 мл; картофельная мука - 5 г; вода дистиллированная - 600 мл.
Реактивы растворяют в
указанной последовательности при слабом
подогреве и стерилизуют 2 ч текучим паром.
Солевая основа может быть
приготовлена с запасом на 3-4 нед.
Яичная масса. 24-27 (в зависимости от величины) свежих диетических яиц
моют проточной теплой водой, щеткой с мылом, погружают на 30 мин в 70%
спирт, затем над спиртовкой в боксе разбивают стерильным пинцетом в колбу
с бусами, хорошо размешивают и к 1 л яичной массы добавляют 600 мл
солевого раствора. Смесь фильтруют через марлевый фильтр, добавляют 20 мл
стерильного 2% раствора малахитового зеленого и разливают в пробирки по 5
мл. Свертывание производят при 85° С в течение 45 мин.
Среда Финна II. Солевая основа: магния сульфат - 0,5 г; натрия цитрат - 1
г; квасцы железоаммиачные - 0,05 г; калия фосфат однозамещенный - 20 г;
аммония цитрат однозамещенный - 20 г; натрия глутамат однозамещенный - 5
г; глицерин - 20 мл; вода дистиллированная - до 1 л.
Ингредиенты растворяют в указанном порядке в теплой дистиллированной
воде. Устанавливают рН 6,3-6,5. Стерилизуют при 1 атм 20 мин.
Яичная среда. 12
яиц моют щеткой с мылом, обрабатывают спиртом.
Разбивают стерильным пинцетом и выливают в стерильную колбу с бусами,
которую после добавления каждого яйца
встряхивают до образования
однородной массы. Добавляют 10 мл 20% водного
раствора малахитового
зеленого и 300 мл солевого раствора. Фильтруют
через марлевый фильтр и
свертывают при температуре 85° С в течение 30 мин.
