Определение чувствительности к оптохину. Выделенную культуру
засевают на 10% агар с кровью, содержащий оптохин 1:50000. Пневмококки, в
отличие от стрептококков, не растут на средах, содержащих оптохин.
Проба с желчью. В агглютинационные пробирки наливают по 1 мл
исследуемой бульонной культуры. В одну из них добавляют каплю кроличьей
желчи, вторая пробирка служит контролем. Обе пробирки помещают в
термостат. Через 18-24 ч наступает лизис пневмококков, который выражается
в просветлении мутного бульона. В контроле взвесь остается мутной.
Пробу с желчью можно поставить на плотной питательной среде. Для этого
на колонию пневмококков, выросших в чашках с агаром и сывороткой, наносят
крупинку сухой желчи - колония растворяется - исчезает.
Четвертый день исследования
Производят учет результатов (табл. 26).
Таблица 26. Дифференциация пневмококка от зеленящего стрептококка Примечание. к - расщепление углеводов с образованием кислоты.
В настоящее время широко используются серологические методы
исследования (РСК и РИГА) для определения стрептококковых антител.
Определение группы и серовара выделенной культуры производят с помощью
флюоресцирующих антител.
Определение вирулентности пневмококка. Суточную бульонную
культуру пневмококка разводят 1% пептонной водой от 10
-2
до 10
-8
, 0,5 мл
каждого разведения вводят двум белым мышам. Культуру, вызвавшую гибель
мышей в разведении 10
-7
, оценивают как вирулентную, в разведении 10
-4
-10
-
6
считают средневирулентной. Культура, не вызвавшая гибель мышей,
авирулентна.
Контрольные вопросы 1. Какие методы выделения чистой культуры пневмококков Вы знаете?
2. Какое животное наиболее чувствительно к пневмококку?
3. Какие реакции ставят с экссудатом зараженной мыши и с какой целью?
4. От каких представителей гноеродных кокков следует дифференцировать
пневмококк и с помощью какой пробы?
5. Как определить вирулентность пневмококков?
Задание Составьте схему исследования мокроты, указав его этапы по дням.