Өсімдік ұлпаларын өсіру және биотехнология бойынша зертханалық

2.
Ине көмегімен каллус бөліктерін, төмендегі варианттар 
бойынша, колбадағы 100 мл Мурасиге және Скугтің сұйық 
қоректік ортасына салады.
 
вариант I - МС + 2 мг/л 2,4-Д; 
вариант II - МС + 10 мг/л ИСҚ:
вариант III - МС + 10 мг/л ИСҚ + 0,1 мг/л БАП; 
вариант IV - МС гормонсыз орта (бақылау). 
3.
Суспензия 
құйылған 
колбаларды 
айналып 
қозғалатын 
шайқағышқа (100-120 айналым/мин) қойып, 2 апта бойы үздіксіз 
шайкайды. 
4.
Суспензиялардың барлық варианттарындағы клеткалардың өсуін 
бақылап, есептеп, қорытынды жасалады. 
№ 2 жұмыс.
 
Клеткалық суспензияның тығыздығын есептеу 
Кажетті материалдар мен аспаптар: 
Каллус клеткаларының суспензиясы. 
8 %-тік хром оксидінің ерітіндісі. 
Микроскоп; центрифуга; стерильді пипетка; зат және жабынды 
шынылар; Фукс-Розенталь (Горясв) камерасы; сүзгі қағазы. 
Жұмыстың орындалу тәртібі: 
1.
Суспензиясы бар колбаны шайқап жіберіп, пипетка көмегімен 
пробиркаға 10 мл суспензия құйып алады. 
2.
1 мл суспензияны хром оксидінің 8 %-тік ерітіндісінің 2 мл-мен 
араластырады да, температурасы 70°С-ға дейін қыздырылған 
термостатта 15 минут ұстайды. 
3.
Қоспаны жуан инесі бар шприц арқылы 3 рет өткізеді 
(пипетирлеу). 
4.
Фукс-Розенталь (Горяев) камерасын суспензиямен толтырады. 
Микроскоп астында клеткаларды санайды. 
5.
Суспензияның тығыздығын (санын) төмендегі формула 
бойынша есептейді: 
M
x
n
x
1000 

X= 
3,2 
Мұнда, Х- клеткалар саны, М - камерадағы клеткалардың орташа 
саны, n - сұйылту дәрежесі. 
№ 3 жұмыс.

Клеткалық суспензиялардың тіршілікке
қабілеттілігін анықтау 
Қажетті материалдар мен аспаптар: 
Клеткалык суспензия. 
0.1 %-тік метил көгінің ерітіндісі. 
Микроскоп; зат және жабынды шынылар; сүзгі қағазы; 
дистильденген су; дәкеден жасалған салфеткалар; пипеткалар.
Жұмыстың орындалутәртібі: 
1.
Клеткалык суспензиясы бар колбаны жайлап шайқайды.
 
2.
Пипеткамен оның аздаған көлемін сорып алады.
 
3.
Зат шынысының үстіне суспензияның 1 тамшысын тамызып, 
оған метилен көгінің 0,1%-тік ерітіндісінің 1 тамшысын қосады. 
Үстін жабынды шынысымен жауып, шетіндегі артық сұйықты 
сүзгі қағазымен сорғызып алады.
 
4.
Препаратты микроскоп столының үстіне қояды да 40 рет үлкейтіп 
қарайды.
 
5.
Тіршілікке қабілетті клеткалар санының проценттік мәнін 
есептейді. Өлі клеткалар боялады.
 

жүктеу/скачать 4,52 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: