Методика фаготипирования. В чашку Петри наливают 20 мл 1,5% МПА,
дают ему застыть и подсушивают в термостате в течение 30-40 мин. На
поверхность агара наносят 1 мл 4-6-часовой культуры выделенного
стафилококка, распределяют по поверхности всей чашки, избыток жидкости
отсасывают или дают ей испариться в термостате в открытой чашке.
Предварительно дно чашки делят на секторы или квадраты. Число квадратов
или секторов должно соответствовать количеству используемых фагов. Затем
на каждый квадрат или сектор наносят один фаг.
Чашки ставят в термостат при температуре 37° С. Результаты определяют
через 6-7 ч. Если чашки оставляют при комнатной температуре, то учет
фаголизиса производят через 18-24 ч.
Биологические пробы. Проба на определение летальных свойств
культуры. Для выявления летального действия токсина кролику вводят
внутривенно (или внутрибрюшинно) фильтрат бульонной культуры
стафилококка из расчета 0,1-0,2 мл фильтрата на 1 кг массы кролика. Гибель
кролика через 3-4 дня свидетельствует о наличии летального действия токсина.
Дермонекротическая проба. Пробу ставят на кролике (наиболее
чувствительному к этому токсину животному). Предварительно на боку или на
спине животного выщипывают шерсть и вводят внутрикожно 0,2 мл
двухмиллиардной взвеси стафилококковой культуры в изотоническом
растворе натрия хлорида. При наличии в выделенной культуре некротических
свойств в месте введения образуется инфильтрат, сопровождающийся
некрозом.
Реакцию учитывают через 24-18 ч.
Полученную культуру стафилококка проверяют на чувствительность к
антибиотикам методом бумажных дисков (см. главу 9).
Контрольные вопросы
1. Какой материал исследуют при заболеваниях, вызываемых
стафилококками?
2. Каковы основные методы лабораторного исследования для выявления
стафилококков?
3. Какова методика постановки реакции плазмокоагуляции?
4. На какой среде выявляют гемолитические свойства стафилококков?
5. С какой целью проводят фаготипирование?
Задание
Проверьте, к какому антибиотику чувствительна выделенная культура
стафилококка.