Биологические методы. Совместное выращивание анаэробов и аэробов. В
чашку Петри наливают толстым слоем агар с 5% крови. По диаметру чашки
делают в агаре желобок, чтобы культуры не смешивались. На одну половину
засевают культуру аэроба, на другую - анаэроба. Края чашки заливают
парафином. Посевы помещают в термостат. Сначала вырастают аэробы, после
того как они поглощают весь кислород, находящийся в чашке, начинают расти
анаэробы.
Добавление в среду редуцирующих (окисляющих) веществ. Используют
среду Китта - Тароцци, содержащую в качестве редуцирующих веществ 0,5%
раствор глюкозы и кусочки мяса. Перед посевом среду кипятят 20 мин на
водяной бане - удаляют растворенный в ней кислород. Быстро остужают до 45°
С и засевают, не дав среде вновь насытиться кислородом. Сразу после посева
в пробирку на поверхность среды наливают стерильное масло слоем 1-1,5 см,
чтобы защитить посев от воздуха. Посевы выращивают в термостате.
Питательные среды Среда Китта - Тароцци. Бычью печень или мясо нарезают мелкими
кусочками, заливают троекратным количеством питательного бульона рН 7,4-
7,6, кипятят 30 мин. Бульон фильтруют. Печень промывают на сите водой,
распределяют в пробирки по 3-4 кусочка в каждую, заливают 7-8 мл бульона.
Стерилизуют под давлением 1 атм 30 мин.
Кровяной агар. 3% МТТА с 1-2% глюкозы рН 7,2-7,4 смешивают с 15-20%
свежей дефибринированной крови барана или лошади. Разливают в чашки
Петри. Подсушивают в термостате 20-30 мин. Можно пользоваться кровью
кролика или морской свинки, взятой из сердца стерильно, в количестве 5-1%
среды.
Среда Вильсона - Блера. 100 мл 3% МПА с 1% глюкозы расплавляют на
водяной бане, добавляют 10 мл 20% натрия сульфита и 1 мл 8% раствора
железа хлорида. Оба раствора готовят на стерильной дистиллированной воде
и кипятят. Приготовленную среду разливают в пробирки по 7-8 мл.
