С курсом факультета повышения квалификации и переподготовки кадров



Pdf көрінісі
бет141/375
Дата31.12.2021
өлшемі2,61 Mb.
#21760
1   ...   137   138   139   140   141   142   143   144   ...   375
Байланысты:
Farmatsevticheskaia biotekhnologiia Moiseev-DV 2020


Часть 2. Частные вопросы биотехнологии. Клеточная биотехнология 
 
 
112
 
 
лунках  с  культурой.  Используют  по  четыре  лунки  на  каждое  разведение 
вируса,  начиная  с  разведения,  соответствующего  0,1  условных  единиц 
активности с коэффициентом разведения ×10. 
После  внесения  индикаторного  вируса  и  титрования  его  дозы, 
культуру  клеток  инкубируют  при  температуре  (37,0  ±1,0)°С,  (5,0±0,5) % 
СО
2
 и (70±5) % влажности. 
Учет  определения  активности  интерферона  осуществляет  через  24–
48  часов,  когда  доза  внесенного  вируса  соответствует  100  условным 
единицам  активности.  Учет  результатов  проводят  в  случае  отсутствия 
дегенерации  в  контрольной  культуре.  За  титр  интерферона  принимают 
величину,  обратную  разведению  препарата,  при  котором  клеточная 
культура  в  50 %  лунок  оказалась  полностью  защищенной  от 
цитопатического действия вируса. 
Пересчет  активности  интерферона  (X)  в  МЕ  выполняется  по 
формуле: 
 
 
 
Специфическую  безопасность  проверяют  на  животных  (тест 
«токсичность»)  и  на  культурах  клеток,  которые  используются  в 
определении  противовирусной  активности.  Для  этого  односуточный 
монослой вносят в планшеты, добавляют ту же питательную среду, что и 
для  определения  активности,  и  разведения  интерферона-α.  Инкубируют  в 
течение  трех  суток  при  условиях,  описанных  выше.  Не  должно  быть 
разрушения  клеток.  В  контроле  без  определяемого  вещества 
(отрицательный контроль) также не должно быть разрушения клеток. 
 
 


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   137   138   139   140   141   142   143   144   ...   375




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет