животными наблюдают в течение 48±2 ч. В качестве контроля берут три
разведения яда.
Удельную активность вычисляют по формуле:
УА = а × 10 / в,
где а – количество АЕ в 1 мл сыворотки; в – содержание белка в
процентах.
12.3 Получение и стандартизация моноклональных антител
В 1955 году датчанин Н. Ерне сформулировал клонально-
селекционную теорию, согласно которой каждый лимфоцит несет
информацию для синтеза определенного АТ. Во время иммунного ответа
клетки усиленно делятся и продуцируют специфические АТ (против
конкретного антигена или его части). При этом, вырастив лимфоцит в
питательной среде можно получить его потомство, которое будет
продуцировать специфические антитела.
Для практического применения АТ в диагностике и терапии
необходимо было создать такую линию клеток, которая росла бы в
культуре и продуцировала АТ одного типа, обладающие высоким
сродством к специфическому АГ-мишени, – моноклональные антитела.
К сожалению, В-лимфоциты, синтезирующие АТ, не могут
воспроизводиться в культуре. Решение данной проблемы виделось в
создании гибридной клетки. От В-лимфоцита она получила бы
способность к выработке АТ, а от клетки совместимого типа – способность
к делению и росту в культуре. Было известно, что В-лимфоциты иногда
перерождаются и становятся раковыми (миеломными) клетками,
приобретая способность к росту в культуре. Так клетки миеломы, в первую
очередь те, которые не вырабатывают АТ, стали кандидатами на слияние с
АТ-продуцирующими В- лимфоцитами. В середине 70-х гг. эти идеи стали
реальностью благодаря работам немца Г. Келера и аргентинца Ц. Мильштейна. Эти ученые разработали гибридомную технологию