Глава 16. ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ
ВИТАМИНОВ
195
подкисляется до рН 4,0–4,5. После использования углеродного субстрата
продуцент начинает утилизировать кислоты, рН повышается, и затем
начинается образование витамина В
2
. При этом кристаллы рибофлавина
накапливаются в гифах и вне мицелия. На постферментационной стадии для
выделения витамина мицелий нагревают в течение 1 ч при 120°С. Очистку
проводят перекристаллизацией.
В ряде стран для получения кормовых препаратов витамина В
2
используют достаточно простой способ, основанный на выращивании
микроскопического гриба Eremothecium ashbyii в глубинной культуре в
течение 80–84 ч при 28–30°С на среде с глюкозой или мальтозой (2,5%),
источником азота в виде NH
4
NO
3
и карбоксидом кальция (0,5%). Выход
рибофлавина составляет 1250 мкг/мл. Культуральная жидкость
концентрируется в вакуумном испарителе до содержания сухих веществ 30–
40% и высушивается в распылительной сушилке. Товарная форма продукта
– порошок с содержанием рибофлавина не менее 10 мг/г и 20% сырого
протеина. В препарате присутствуют также никотиновая кислота и
витамины В
1
, В
3
, В
6
и В
12
.
При использовании штамма Bacillus subtilis, полученного
генноинженерным методом, выход рибофлавина составляет 4 г/л за 35 суток
ферментации. Бактерии выращивают на питательных средах следующего
состава: источник углерода (сахариды, органические кислоты), источник
азота ((NH
4
)
2
SO
4
, NH
4
Cl, (NH
4
)
3
PO
4
, гидролизат соевых бобов), витамин В
1
,
нуклеиновые кислоты или дрожжевой экстракт, соли кальция, магния,
железа и марганца. Ферментацию осуществляют при 30–45°С при рН=5–8 в
условиях хорошей аэрации.