С курсом факультета повышения квалификации и переподготовки кадров



Pdf көрінісі
бет98/375
Дата31.12.2021
өлшемі2,61 Mb.
#21760
1   ...   94   95   96   97   98   99   100   101   ...   375
Байланысты:
Farmatsevticheskaia biotekhnologiia Moiseev-DV 2020


Глава 6. МЕТОДОЛОГИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ К ВЫДЕЛЕНИЮ И  
ОЧИСТКЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ 
 
 
 
79 
 
какое-нибудь одно конкретное вещество. Например, фермент очищают на 
колонке,  заполненной  его  субстратом  или  специфическим  ингибитором. 
Весьма эффективный метод разделения и очистки белковых и небелковых 
веществ  основан  на  взаимодействии  антигенов  и  антител.  Разработанный 
на  основании  таких  взаимодействий  способ  получил  название 
иммуноаффинной  хроматографии  и  существенно  повысил  разрешающую 
способность  при  введении  в  практику  использования  моноклональных 
антител.  Блестящей  иллюстрацией  его  эффективности  является  высокая 
степень  одноэтапной  очистки  человеческого  интерферона  (чистота 
повышается  примерно  в  500  раз).  В  аффинной  хроматографии  могут 
использоваться  групповые  лиганды,  связывающие,  например,  группу 
сходных по структуре ферментов. Такими лигандами являются кофакторы 
ферментов или их аналоги. Могут применяться и еще менее специфичные 
лиганды,  связывающие  довольно  обширные  классы  веществ;  например, 
алкильные  и  арильные  группы  или  лиганды,  представляющие  собой 
текстильные  красители.  Преимущество  аффинной  хроматографии  состоит 
в  том,  что  с  ее  помощью  можно  в  одну  стадию  осуществить  полную 
очистку  продукта  из  сложной  многокомпонентной  смеси  (культуральной 
жидкости,  цельных  клеточных  экстрактов  и  т.  п.),  тогда  как  другие 
способы  требуют  многоэтапной  очистки  и  сопряжены  с  большими 
затратами  труда  и  времени.  Однако  метод  имеет  и  ряд  недостатков,  в 
частности  высокая  цена  материалов,  используемых  в  аффинной 
хроматографии (например, веществ, применяемых в качестве  лигандов), а 
также быстрое забивание колонки пропускаемыми веществами. Последнее 
заставляет использовать их в периодическом, а не в непрерывном режиме. 
После  каждого  выделения  продукта  колонки  промывают  и  частицы 
заполняющего  геля  также  подвергаются  очистке.  Помимо  аффинной 
хроматографии  (которая  иногда  называется  еще  аффинной  адсорбцией  в 
геле)  в  крупномасштабных  биотехнологических  процессах  для  очистки 
продуктов  все  шире  применяют  аффинную  преципитацию  и  аффинное 

Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   94   95   96   97   98   99   100   101   ...   375




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет