В данном обзоре рассмотрены основные методы создания гетерологических биохимических путей в различных организмах, основные проблемы, воз- никающие при этом, и основные подходы к их ре- шению


СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ИНЖЕНЕРИИ ВЕКТОРОВ



Pdf көрінісі
бет6/15
Дата17.01.2023
өлшемі0,69 Mb.
#61672
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   15
СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ИНЖЕНЕРИИ ВЕКТОРОВ
Выбор необходимого вектора для переноса генов 
метаболического пути во многом определяется ор-
ганизмом-хозяином планируемой гетерологической 
экспрессии. Вектор должен эффективно проникать 
в клетки-мишени, стабильно реплицироваться в вы-
бранном хозяине либо путем включения в геном, либо 
в виде внегеномной ДНК [44], а кодируемые в нем 
гены должны эффективно транскрибироваться [4]. 
Векторы экспрессии можно разделить на две основ-
ные категории: внехромосомные и интегративные 
(рис. 2).


32 | 
ACTA NATURAE
| ТОМ 12 № 2 (45) 2020
ОБЗОРЫ
Внехромосомные векторы 
Внехромосомные генетические элементы (плазми-
ды) были впервые разработаны в качестве вектор-
ной системы для бактерий более 40 лет назад [45, 46]. 
Сегодня плазмидные векторы считаются основным 
инструментом в области метаболической инжене-
рии различных микроорганизмов. Преимущества 
плазмидных конструкций заключаются в простоте 
Рис. 2. 
Внеге-
номные и ин-
тегративные 
системы достав-
ки генетических 
конструкций. 
Схематически 
изображены ме-
ханизмы вклю-
чения внехромо-
сомных (сверху) 
и интегративных 
(снизу) векторов 
в клетку хозяина


ОБЗОРЫ
ТОМ 12 № 2 (45) 2020 | 
ACTA NATURAE
33
их сборки с использованием методов молекулярной 
биологии, а также в достаточно большой генетиче-
ской емкости. Недостатками плазмидных векторов 
являются возможность их спонтанной рекомбинации 
в организме-хозяине, необходимость постоянного 
селективного давления для предотвращения поте-
ри плазмиды и (в случае использования нескольких 
плазмид) потребность в большом количестве различ-
ных селективных маркеров [4]. 
Недавняя разработка модульной системы клони-
рования и коммерческая доступность стандартных 
частей значительно упростили разработку внехро-
мосомных дрожжевых плазмид, делая возможной 
сборку как низко-, так и высококопийных плазмид 
с одной или несколькими кодирующими последова-
тельностями [47].


Достарыңызбен бөлісу:
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   15




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет