Высокоэффективной жидкостной хроматографией (вэжх) принято называть метод колоночной хроматографии, в котором подвижной фазой (ПФ) служит жидкость, а размер частиц сорбентов обычно 3 – 10 мкм
жүктеу/скачать 115,5 Kb.
|
ОФС ВЭЖХ
| Неподвижная фаза (сорбент)
В качестве сорбентов обычно применяются: силикагель, оксид алюминия, используются в нормально-фазовой хроматографии. Механизм удерживания в данном случае – обычно адсорбция; силикагель, смолы или полимеры с привитыми кислотными или основными группами. Область применения – ионообменная и ионная хроматография; силикагель или полимеры с заданным распределением размеров пор (эксклюзионная хроматография); химически модифицированные сорбенты (сорбенты с привитыми фазами), приготовленные чаще всего на основе силикагеля. Механизм удерживания ‑ адсорбция или распределение между подвижной и неподвижной фазами. Область применения зависит от типа привитых функциональных групп. Некоторые типы сорбентов могут использоваться как в обращенной, так и в нормально фазовой хроматографии; химически модифицированные хиральные сорбенты, например, производные целлюлозы и амилозы, протеины и пептиды, циклодекстрины, хитозаны, используемые для разделения энантиомеров (хиральная хроматография). Сорбенты с привитыми фазами могут иметь различную степень химической модификации. В качестве привитых фаз наиболее часто применяются: – октадецильные группы [Si-(CH2)17-CH3] (сорбент октадецилсилан (ODS) или С18); – октильные группы [Si-(CH2)7-CH3] (сорбент октилсилан или С8); – фенильные группы [Si-(CH2)n-(C6H5)] (сорбент фенилсилан); – цианопропильные группы [Si-(CH2)3-CN] (сорбент CN); – аминопропильные группы [Si-(CH2)3-NH2] (сорбент NH2); – диольные группы [Si-(CH2)3-OCH(OH)-CH2-OH] (сорбент диол). Наиболее часто анализ выполняют на неполярных привитых фазах в обращенно-фазовом режиме с применением сорбента С18. Сорбенты с привитыми фазами, полученные на основе силикагеля, химически устойчивы при значениях pH от 2,0 до 7,0, если другое специально не оговаривается производителем. Частицы сорбента могут иметь сферическую или неправильную форму и разнообразную пористость. Размер частиц сорбента в аналитической высокоэффективной жидкостной хроматографии обычно составляет 3–10 мкм, в препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии – 50 мкм и более. Существуют также монолитные колонки, в которых сорбент представляет собой монолит со сквозными порами, заполняющий весь объем колонки. Высокая эффективность разделения обеспечивается высокой площадью поверхности частиц сорбента (которая является следствием их микроскопических размеров и наличия пор), а также равномерностью состава сорбента и плотной и равномерной его упаковкой. жүктеу/скачать 115,5 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|