Методы индикации. Индикация вирусов с помощью реакции гемагглютинации (РГА). Под действием вирусного гемагглютинина in vitro происходит склеивание эритроцитов. Индикацию вирусов можно проводить по их цитопатогенному действию (ЦПД) на культуру клеток. Существуют методы титрования (количественное определение) вирусов.
Методы идентификации. Основными серологическими реакциями, используемыми для идентификации вирусов, являются: реакция торможения гемагглютинации, реакция нейтрализации в культуре клеток и иммуноферментный метод (ИФА), основанный на реакции «антиген-антитело», который позволяет выявить вещества белковой природы.
Реакция торможения гемагглютинации РТГА.
Постановка РТГА: вначале соединяют вируссодержащую жидкость с разведениями диагностических сывороток в лунках и оставляют для контакта на 30-40 минут при комнатной температуре. Затем во все лунки вносят взвесь эритроцитов. Учет реакции производят через 1 -2 часа.
Если тип вируса соответствует типу сыворотки, то вирусный гемагглютинин будет блокироваться антителами сыворотки, что проявляется отсутствием агглютинации эритроцитов. Такая реакция учитывается как положительная. Визуально в лунках определяется осадок эритроцитов с ровными краями, в виде «пуговицы». При отрицательной реакции будет виден «перевёрнутый зонтик».
Реакция нейтрализации (РН) в культуре клеток.
Постановка РН: вначале выделенный цитопатогенный вирус смешивают в пробирках со специфическими диагностическими сыворотками. Смеси выдерживают 1 час при комнатной температуре. Затем этими смесями заражают флаконы с культурой клеток. Если тип вируса соответствует типу сыворотки, то произойдет нейтрализация вируса антителами сыворотки и культура клеток будет без изменений (положительная реакция).
44.Возбудитель ВИЧ-инфекции. Общая характеристика. Основные группы риска. Понятие о СПИДе. Микробиологическая диагностика и профилактика ВИЧ-инфекции. Возбудитель – Retroviridae Lentivirus.
