Ферменттер - рестрикциялық эндонуклеазалар немесе рестрикциялық эндонуклеазалар - гендік инженериядағы күшті құрал. Шектеу сөзбе-сөз «шектеу» дегенді білдіреді. Бактерия жасушалары вирустық инфекцияны шектеу үшін қажет болатын бөтен, ең алдымен фаг, ДНҚ-ны жою үшін рестрикциялық эндонуклеазалар түзеді. Шектеу ферменттері нуклеотидтердің бірізділіктерін таниды және симметриялы, бір-бірінен қиғаш орналасқан, тану алаңының центрінен бірдей қашықтықта ДНҚ тізбектерін үзеді. Нәтижесінде, шектелген ДНҚ-ның әрбір фрагментінің ұштарында қысқа бір тізбекті «құйрықтар» («жабысқақ» ұштар деп те аталады) пайда болады.
Ферменттер - рестрикциялық эндонуклеазалар немесе рестрикциялық эндонуклеазалар - гендік инженериядағы күшті құрал. Шектеу сөзбе-сөз «шектеу» дегенді білдіреді. Бактерия жасушалары вирустық инфекцияны шектеу үшін қажет болатын бөтен, ең алдымен фаг, ДНҚ-ны жою үшін рестрикциялық эндонуклеазалар түзеді. Шектеу ферменттері нуклеотидтердің бірізділіктерін таниды және симметриялы, бір-бірінен қиғаш орналасқан, тану алаңының центрінен бірдей қашықтықта ДНҚ тізбектерін үзеді. Нәтижесінде, шектелген ДНҚ-ның әрбір фрагментінің ұштарында қысқа бір тізбекті «құйрықтар» («жабысқақ» ұштар деп те аталады) пайда болады.
Бактерияларды алудың клондау деп аталатын процесі келесі кезеңдерден тұрады:
1. Шектеу - адамның ДНҚ-ны рестрикт ферментінің көмегімен көптеген әртүрлі фрагменттерге кесуі. ДНҚ плазмидасын бірдей рестрикт ферментімен кесу арқылы бірдей ұштар алынады.
2. Лигитация - лигаза ферментінің «жабысқақ ұштарын тігуіне» байланысты адамның ДНҚ фрагменттерін плазмидаларға қосу.
3. Трансформация - рекомбинантты плазмидаларды бактерия жасушаларына арнайы әдіспен өңделген, оларды макромолекулаларға аз уақыт ішінде өткізгіш етіп енгізу. Алайда, плазмидтер өңделген бактериялардың тек бір бөлігіне енеді. Трансформирленген бактериялар плазмидамен бірге белгілі бір антибиотикке төзімділікке ие болады. Бұл оларды осы антибиотик бар ортада өлетін трансформацияланбаған бактериялардан бөлуге мүмкіндік береді. Ол үшін бактериялар қоректік ортаға себіледі, бұған дейін сұйылтылған, сондықтан елеу кезінде жасушалар бір-бірінен едәуір қашықтықта орналасады. Трансформацияланған бактериялардың әрқайсысы көбейіп, көптеген мыңдаған ұрпақтан тұратын колония - клон құрайды.
