Дәріс №5. Биотехнологияның жаңа әдістері, оны фармакология мен медицинада қолдану мүмкіндіктері Жоспары
жүктеу/скачать 397,55 Kb. Pdf көрінісі
|
Дәріс №5. Конспект 5
- Бұл бет үшін навигация:
- Электрофорез
| Аффиндік
хроматография әдісі әлдеқайда тиімді (жақындық хроматографиясы). Бұл әдіс ақуыз молекулаларының бетінде болатын биологиялық маңызды өзара әрекеттесуге негізделген. Аффиндік хроматографияда белгілі бір ақуызды қосатын белгілі бір лигандтармен (антиденелер немесе ферменттер субстраты) ковалентті байланысқан ерімейтін матрица қолданылады. Иммобилизацияланған субстратпен байланысқан фермент молекулаларын субстраттың концентрацияланған ерітінділерімен еркін түрде элюциялауға болады, ал иммобилизацияланған антиденелермен байланысқан молекулаларды антидене–антиген кешенінің концентрацияланған тұз ерітінділерімен немесе төмен немесе жоғары рН ерітінділерімен ыдырауына байланысты элюциялауға болады. Мұндай бағандағы бір хроматография көбінесе препаратты тазартудың өте жоғары деңгейіне қол жеткізуге мүмкіндік береді. Аффиндік хроматография өнімді күрделі көп компонентті қоспадан – культуралық сұйықтықтан, жасуша сығындысынан бір сатыда толық тазартуды қамтамасыз ете алады, ал дәстүрлі тұндыру әдістері мен ион алмасу хроматографиясы көп сатылы тазартуды қажет етеді, бұл үлкен еңбек пен уақытты қажет етеді. Аффиндік хроматография үшін материалдардың, атап айтқанда лиганд ретінде қолданылатын заттардың салыстырмалы түрде қымбаттығы белгілі бір қолайсыздықты тудырады. Электрофорез – ақуыздар мен нуклеин қышқылдарын бос сулы ерітіндіде және кеуекті матрицада бөлу әдісі, мысалы, крахмал немесе агароза сияқты 6 полисахаридтерді қолдануға болады. Биомолекулалар, әдетте, олардың бетінде аминқышқылдарының оң немесе теріс зарядталған топтарының болуына байланысты жалпы оң немесе теріс зарядты алады. Егер ақуыз молекулалары электр өрісіне қойылса, олар жылдамдықпен қозғала бастайды, бұл олардың жалпы заряды, пішіні мен мөлшері бойынша анықталады. Көлденең және тік электрофорезге арналған шағын камералар жүктеу/скачать 397,55 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|