Доклинические исследования лекарственных средств на биологических моделях инсульта
жүктеу/скачать 182,05 Kb. Pdf көрінісі
|
| ЖУРНАЛ НЕВРОЛОГИИ И ПСИХИАТРИИ, 12, 2017; Вып. 2
Методы фокальной ишемии мозга являются наиболее подходящими для тестирования новых ле- карственных препаратов, поскольку позволяют по- лучить значимый неврологический дефицит и чет- кое морфологическое повреждение [2]. Предпочти- тельнее выбирать общепринятые модели инсульта и сходный дизайн исследования, поскольку это по- зволит в будущем использовать результаты исследо- вания для метаанализа. Наиболее используемыми моделями фокальной ишемии головного мозга в каротидном бассейне яв- ляются: 1) филаментная окклюзия средней мозго- вой артерии (СМА) по Коидзуми [8, 11, 21, 22, 24, 33, 34] — самая малоинвазивная модель ишемии, которая не требует трепанации черепа [35, 36]; 2) фототромбоз СМА, для повышения свертываемо- сти крови вводится фотосенсибилизатор бенгаль- ский розовый [11, 21, 28]; 3) эмболизация СМА [11, 15, 16, 21]; 4) манипуляции со СМА требуют выпол- нения трепанации черепа в проекции артерии [11, 21, 23] — перевязка СМА (перманентная фокальная ишемия) [20, 37], транзиторная окклюзия СМА на 30—40 мин [37, 38], аппликация эндотелина-1 в проекции СМА (вазоспастическая модель ишемии мозга) [39], перевязка СМА и обеих сонных артерий (перманентная фокальная ишемия) [20], перевязка СМА с одновременным снижением артериального давления (АД) за счет депонирования крови в шприц (модель транзиторной ишемии) [20, 40, 41], окклю- зия СМА и гомолатеральной общей сонной артерии (перманентная фокальная ишемия) [20], перевязка СМА и обеих сонных на 40 мин (стандартно на 30 40, 60 мин — транзиторная фокальная ишемия) [42]. В настоящем исследовании модели, связанной с манипуляциями на сонных и СМА у крысы, проде- монстрировали, что наиболее воспроизводимым методом является перевязка СМА и одновременная окклюзия обеих общих сонных артерий на 40 мин, позволяющие получить значимый однородный нев- рологический дефицит и размер инфаркта [23, 29]. Модели, связанные с изолированной перевязкой СМА или совместной перевязкой СМА и гомолате- ральной СМА, не позволяют получить значимый неврологический дефицит и большой размер ин- фаркта [23, 32]. Модели ишемии в вертебрально-базилярной си- стеме менее распространены из-за несовершенства методологии и трудности воспроизведения, поэто- му они используются крайне редко. Методы глобальной ишемии мозга [26, 28] ис- пользуются для разработки интраоперационных нейропротекторов, поскольку этот патогенетиче- ский вариант ишемии чаще встречается как прояв- ление периоперационного инсульта или послеопе- рационных когнитивных нарушений. В отечествен- ной литературе представлены следующие наиболее используемые и интересные модели общей ишемии мозга [43]: 1) четырехсосудистая модель — перевяз- ка позвоночных и сонных артерий [44, 45]; 2) ок- клюзия обеих сонных артерий у животных с незамк- нутым виллизиевым кругом, например у монголь- ской песчанки [46]; 3) окклюзия обеих общих сон- ных артерий у крыс [20, 46] в сочетании с управляе- мой гипотензией [20, 40, 47]; 4) декапитация [46]; 5) остановка сердца животного [46, 48]. Модель об- щей ишемии не может быть рассмотрена как основ- ной метод для тестирования нейропротекторов и предназначена для решения отдельных экспери- ментальных задач, связанных с разработкой интра- операционной защиты от ишемии мозга [43]. Распространенной моделью экспериментально- го ишемического инсульта для тестирования нейро- протекторов является филаментная окклюзия СМА у крыс или мышей, выполненная по методу Коидзу- ми [33]. Использование этой модели для изучения нейропротективных вмешательств считается опти- мальным. При разной продолжительности окклю- зии можно получить повреждения разных зон го- ловного мозга. Так, при использовании 30-минут- ной окклюзии СМА можно смоделировать преиму- щественное повреждение области стриатума [35, 36]. При более длительной ишемии повреждение распространяется на все области, включая кору го- ловного мозга [10, 24, 35, 36]. Распространенной моделью экспериментально- го эмболического ишемического инсульта для те- стирования тромболитиков и нейропротекторов яв- ляется эмболическая окклюзия СМА у крыс или мышей. Применение этой модели позволит исполь- зовать полученные данные для дальнейшего мета- анализа или систематического обзора [11, 15, 16, 21, 49]. Для крыс и мышей рекомендуется применять следующие виды анестезии: золетил и флюраны. Также могут быть использованы: хлоралгидрат, тио- пентал или нембутал. Неприемлемыми для крыс и мышей являются ромитар, хлорэтил, для мышей — кетамин. Современные представления о патогенезе ише- мического инсульта свидетельствуют, что размер инфаркта мозга зависит не только от продолжитель- ности ишемии, но также от дополнительных факто- ров [11, 17]. Так, к факторам, способствующим уве- личению размеров повреждения головного мозга, относятся лихорадка, снижение АД, дыхательная гипоксия, хроническая инфекция, активность жи- вотного, физическая нагрузка, стресс и др. Факто- ры, уменьшающие повреждение мозга: снижение температуры тела (часто бывает во время операции из-за релаксации и наркоза), использование анти- биотиков в кормах (они могут обладать нейропро- тективными эффектами), инфекционные заболева- ния животных (феномен инфекционного преконди- ционирования). Поэтому при моделировании ин- |